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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 有关pcDNA TA克隆的问题？
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ivyvampire

新虫 (正式写手)

[求助] 有关pcDNA TA克隆的问题？ 已有2人参与

同志们有做过这个载体吗？
俺今天做的时候发现回收PCR产物的那个试剂盒的洗脱液是TE，不知道会不会影响跟pcDNA载体的连接啊？
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1楼 2014-01-06 17:35:07
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-01-07 10:32:09
ivyvampire: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 诶，我问过life的技术支持了，没问题 2014-01-07 11:10:15
本来DNA回收试剂盒里的洗脱液基本上都是TE。由于做连接所用DNA量很少，而且连接酶缓冲液里有过量的离子，少许EDTA对连接反应影响不大。你实在不放心的话可以用水洗脱，不过效率不如TE好。
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2楼2014-01-07 01:16:08
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
ivyvampire: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢帮助 2014-01-07 11:10:30
提供TEbuffer的试剂盒真的是少见，一般提供的EB buffer都只是Tris配的，不含EDTA，但少量的EDTA不影响后续实验
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-01-07 10:33:11
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