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ivyvampire

新虫 (正式写手)

[求助] 有关pcDNA TA克隆的问题? 已有2人参与

同志们有做过这个载体吗?
俺今天做的时候发现回收PCR产物的那个试剂盒的洗脱液是TE,不知道会不会影响跟pcDNA载体的连接啊?
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流! 2014-01-07 10:32:09
ivyvampire: 金币+5, ★★★★★最佳答案, 诶,我问过life的技术支持了,没问题 2014-01-07 11:10:15
本来DNA回收试剂盒里的洗脱液基本上都是TE。由于做连接所用DNA量很少,而且连接酶缓冲液里有过量的离子,少许EDTA对连接反应影响不大。你实在不放心的话可以用水洗脱,不过效率不如TE好。
2楼2014-01-07 01:16:08
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gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
ivyvampire: 金币+5, ★★★很有帮助, 谢谢帮助 2014-01-07 11:10:30
提供TEbuffer的试剂盒真的是少见,一般提供的EB buffer都只是Tris配的,不含EDTA,但少量的EDTA不影响后续实验
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-01-07 10:33:11
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