应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做细菌的双重荧光pcr
51/1返回列表
查看: 1410  |  回复: 14
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

a3200649

铜虫 (正式写手)

[求助] 做细菌的双重荧光pcr 已有1人参与

请问做2种细菌的双重荧光pcr，我用的是菌种，必须要制备标准品吗（进行PCR扩增，并将目的片段克隆于pMD18-T，
构建重组质粒，提取质粒进行PCR分析和测序验证）？必须要这一步吗？

如果不制备标准品，直接提取菌种DNA，然后并利用OD260nm/OD280nm比值来确定DNA的纯度，然后进行梯度稀释，测检测限，这样可以吗？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
希望大家多多交流
1楼 2014-01-02 09:14:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a3200649

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by sxxuan at 2014-01-02 10:30:21
如果引探是能用的，最好还是拿公认的那种引探来做个对比，以证明效果。

谢谢，再请教你3个问题，1.我用荧光pcr设计的引探中的引物来作为标准品前期的pcr扩增的引物是不是不可以啊（听老师说是荧光pcr的引物扩增出来的DNA要比普通的引物pcr的要短） 需要从新设计一段普通pcr的引物
2.这个实验阳性标准品大约需要多少时间做的完啊（从扩增，到测序得到标准品）？我是新手，不太会！
3.我可不可以用其他文献的针对细菌某特异性基因的引物（例如 李斯特菌的hly特异性基因）来设计作为我该细菌普通pcr的引物呢？
谢谢
赞一下 回复此楼
希望大家多多交流
7楼2014-01-02 10:38:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
a3200649: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2014-01-02 09:37:52
gyesang: 金币+1, 鼓励交流！ 2014-01-02 13:36:02
看看你的目的是什么，如果只是看看荧光的，有没有标准品都无所谓。但是涉及到发文章论文之类的，没有标准品谁确定你检测出的荧光就是你说的哪个？起码有个对照。
赞一下 回复此楼
你的日子如何，你的力量也必如何！
2楼2014-01-02 09:30:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a3200649

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sxxuan at 2014-01-02 09:30:51
看看你的目的是什么，如果只是看看荧光的，有没有标准品都无所谓。但是涉及到发文章论文之类的，没有标准品谁确定你检测出的荧光就是你说的哪个？起码有个对照。

明白！谢谢
回复此楼
希望大家多多交流
3楼2014-01-02 09:37:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a3200649

铜虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by sxxuan at 2014-01-02 09:30:51
看看你的目的是什么，如果只是看看荧光的，有没有标准品都无所谓。但是涉及到发文章论文之类的，没有标准品谁确定你检测出的荧光就是你说的哪个？起码有个对照。

我说的已知需要检测的菌种可不可以算是标准品呢？
赞一下 回复此楼
希望大家多多交流
4楼2014-01-02 09:40:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 体制内长辈说体制内绝大部分一辈子在底层，如同你们一样大部分普通教师忙且收入低 +10 瞬息宇宙 2026-02-20 13/650 2026-02-23 11:23 by holypower
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 8rmuugja8q 2026-02-22 7/350 2026-02-23 09:44 by w4l55oybr1
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 09:35 by w4l55oybr1
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 09:29 by w4l55oybr1
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +5 usprnugpzw 2026-02-21 11/550 2026-02-23 09:24 by w4l55oybr1
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 w89i99eaeh 2026-02-22 5/250 2026-02-23 08:04 by w4l55oybr1
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 6/300 2026-02-23 07:59 by w4l55oybr1
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +6 3dfhjxgsh7 2026-02-22 9/450 2026-02-23 07:49 by w4l55oybr1
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 4/200 2026-02-23 06:46 by jsjzfl
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 khieu8v8m0 2026-02-22 5/250 2026-02-23 06:29 by w4l55oybr1
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 khieu8v8m0 2026-02-22 8/400 2026-02-23 06:24 by w4l55oybr1
[考博] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +5 3dfhjxgsh7 2026-02-22 6/300 2026-02-23 02:04 by 5jlh3qtdvx
[教师之家] 版面费该交吗 +7 苹果在哪里 2026-02-22 8/400 2026-02-22 22:37 by otani
[论文投稿] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +4 usprnugpzw 2026-02-21 6/300 2026-02-22 19:48 by w89i99eaeh
[考研] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 3dfhjxgsh7 2026-02-22 4/200 2026-02-22 16:52 by khieu8v8m0
[找工作] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 usprnugpzw 2026-02-22 3/150 2026-02-22 16:37 by khieu8v8m0
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8 O5 51O 54,科目齐全,可+急 +3 usprnugpzw 2026-02-21 4/200 2026-02-22 16:27 by khieu8v8m0
[基金申请] “人文社科而论，许多学术研究还没有达到民国时期的水平” +4 苏东坡二世 2026-02-18 5/250 2026-02-22 16:07 by liangep1573
[基金申请] 什么是人一生最重要的？ +4 瞬息宇宙 2026-02-21 4/200 2026-02-22 11:44 by huagongfeihu
[基金申请] 今年春晚有几个节目很不错，点赞！ +11 瞬息宇宙 2026-02-16 12/600 2026-02-21 21:14 by lq493392203
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭