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北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
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a3200649

铜虫 (正式写手)

[求助] 做细菌的双重荧光pcr 已有1人参与

请问做2种细菌的双重荧光pcr,我用的是菌种,必须要制备标准品吗(进行PCR扩增,并将目的片段克隆于pMD18-T,
构建重组质粒,提取质粒进行PCR分析和测序验证)?必须要这一步吗?

如果不制备标准品,直接提取菌种DNA,然后并利用OD260nm/OD280nm比值来确定DNA的纯度,然后进行梯度稀释,测检测限,这样可以吗?
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sxxuan

金虫 (著名写手)

如果引探是能用的,最好还是拿公认的那种引探来做个对比,以证明效果。
你的日子如何,你的力量也必如何!
6楼2014-01-02 10:30:21
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sxxuan

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
a3200649: 金币+20, ★★★★★最佳答案 2014-01-02 09:37:52
gyesang: 金币+1, 鼓励交流! 2014-01-02 13:36:02
看看你的目的是什么,如果只是看看荧光的,有没有标准品都无所谓。但是涉及到发文章论文之类的,没有标准品谁确定你检测出的荧光就是你说的哪个?起码有个对照。
你的日子如何,你的力量也必如何!
2楼2014-01-02 09:30:51
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a3200649

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sxxuan at 2014-01-02 09:30:51
看看你的目的是什么,如果只是看看荧光的,有没有标准品都无所谓。但是涉及到发文章论文之类的,没有标准品谁确定你检测出的荧光就是你说的哪个?起码有个对照。

明白!谢谢
希望大家多多交流
3楼2014-01-02 09:37:42
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a3200649

铜虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by sxxuan at 2014-01-02 09:30:51
看看你的目的是什么,如果只是看看荧光的,有没有标准品都无所谓。但是涉及到发文章论文之类的,没有标准品谁确定你检测出的荧光就是你说的哪个?起码有个对照。

我说的已知需要检测的菌种可不可以算是标准品呢?
希望大家多多交流
4楼2014-01-02 09:40:23
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