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tagzhh木虫 (著名写手)
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HPLC每次进样，压力都涨一点，怎么办 已有4人参与
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我是要做花蛤中软骨藻酸的加标回收实验，花蛤我是匀浆后，用甲醇和水，1:1，来进行提取的，重复提取两次。离心取了上清液，过0.22um有机膜，进样，发现每进一针，压力就涨5bar左右或更多，然后平稳，再进样又高，并且不回落。于是不敢往下做了。 后觉的是上清液遇到我的流动相，使得蛋白质析出在柱子了，导致压力升高。于是第二次匀浆液中，我用了甲醇和2%的TCA，还是1:1。离心取了上清液，特意在进样前取了少许上清，滴加了TCA看没有浑浊了，于是进样，还是一进样，压力就涨一点，然后平稳跑，再进再高，如阶梯般。于是不敢再往下做了。 方法是参照国标记忆丧失性贝类毒素软骨藻酸的测定，只不过不管其他文献还是国标，都在有了上清液后，用固相萃取柱净化了一下，可老师不让我这样子。 用的柱子是Zorbax 300SB-C18，2.1*150,5um [ 发自手机版 http://muchong.com/3g ] [ Last edited by tagzhh on 2013-12-29 at 08:53 ] |
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3楼2013-12-29 12:37:26
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tagzhh
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