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制备型HPLC一次进样量多少合适
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| 现在用制备HPLC分离一样品,以前没接触过,想请教一下大家:是不是进样量太大了不好呢?(这台HPLC规定最大进样量是500微升。)一般一次进样量多少合适呢? |
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2楼2012-10-02 20:08:43
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5楼2012-10-03 11:26:42
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【答案】应助回帖
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yjl2007: 金币+2 2012-10-04 07:57:17
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进样量和进样体积是两个不同的概念。 条件还是要摸索,进样量是由分离度决定的。如果色谱峰分的很开,比如隔开5、6分钟,那就不必在乎,进样量多大都没问题,假如挨得很近,有交叉,就要小心了,进样量大会影响分离度的。一般刚开始是从小到大,自己摸索一下。 还有个问题要小心,假如样品是甲醇溶解的,进样体积大的话会严重干扰出峰时间和峰形,因为溶解样品的甲醇干扰了流动相的洗脱强度,这一点如果不注意你会做的很郁闷。假如样品是水溶解的就不存在这个问题。 对于甲醇溶解的样品,进样体积别超过每分钟总流速的50分之一。 |
6楼2012-10-03 20:39:58
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7楼2012-10-04 16:02:18
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