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yjl2007

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[求助] 制备型HPLC一次进样量多少合适

现在用制备HPLC分离一样品，以前没接触过，想请教一下大家：是不是进样量太大了不好呢？（这台HPLC规定最大进样量是500微升。）一般一次进样量多少合适呢？

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1楼2012-10-02 18:34:56

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tianming887

金虫 (正式写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
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yjl2007: 金币+2 2012-10-04 07:57:17

进样量和进样体积是两个不同的概念。

条件还是要摸索，进样量是由分离度决定的。如果色谱峰分的很开，比如隔开5、6分钟，那就不必在乎，进样量多大都没问题，假如挨得很近，有交叉，就要小心了，进样量大会影响分离度的。一般刚开始是从小到大，自己摸索一下。

还有个问题要小心，假如样品是甲醇溶解的，进样体积大的话会严重干扰出峰时间和峰形，因为溶解样品的甲醇干扰了流动相的洗脱强度，这一点如果不注意你会做的很郁闷。假如样品是水溶解的就不存在这个问题。
对于甲醇溶解的样品，进样体积别超过每分钟总流速的50分之一。