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yjl2007

金虫 (正式写手)

[求助] 制备型HPLC一次进样量多少合适

现在用制备HPLC分离一样品,以前没接触过,想请教一下大家:是不是进样量太大了不好呢?(这台HPLC规定最大进样量是500微升。)一般一次进样量多少合适呢?
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tianming887

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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yjl2007: 金币+2 2012-10-04 07:57:17
进样量和进样体积是两个不同的概念。

条件还是要摸索,进样量是由分离度决定的。如果色谱峰分的很开,比如隔开5、6分钟,那就不必在乎,进样量多大都没问题,假如挨得很近,有交叉,就要小心了,进样量大会影响分离度的。一般刚开始是从小到大,自己摸索一下。

还有个问题要小心,假如样品是甲醇溶解的,进样体积大的话会严重干扰出峰时间和峰形,因为溶解样品的甲醇干扰了流动相的洗脱强度,这一点如果不注意你会做的很郁闷。假如样品是水溶解的就不存在这个问题。
对于甲醇溶解的样品,进样体积别超过每分钟总流速的50分之一。
6楼2012-10-03 20:39:58
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wangfei.ac

铁杆木虫 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yjl2007: 金币+2 2012-10-02 21:04:03
不要超过最大进样体积即可,进样体积小分离效果会更好些,可以适当增加浓度以提高制备量。
2楼2012-10-02 20:08:43
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独步青云

新虫 (职业作家)

术中小生

【答案】应助回帖

★ ★
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yjl2007: 金币+2 2012-10-03 08:04:34
在样品溶解的情况下,自己考察进多少后目标成分难以与其它成分分离时,即达到限度了。
3楼2012-10-02 22:28:55
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tongliwoai

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yjl2007: 金币+2 2012-10-03 08:04:58
这个应该先试一下,有的时候进样量太大分不开。
在能分开的前提下逐渐增大进样量和流速提高分离效率
春有百花秋有月,夏有凉风冬有雪,若无闲事挂心头,便是人间好时节
4楼2012-10-03 07:54:18
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