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关于大肠杆菌表达目标蛋白问题
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sophia-yxh
铜虫
(正式写手)
应助: 3
(幼儿园)
金币: 329.2
帖子: 528
在线: 245.2小时
虫号: 1358919
[交流]
关于大肠杆菌表达目标蛋白问题
最近几批的发酵过程中发现,发酵所得的目标蛋白的260的吸光度接近是280时的3倍,可以判定里面几乎全部是核酸,目标蛋白很少了。
后来我查阅资料发现我们添加的tryptone和酵母粉(OXOID)中氨基酸成分有几种是没有的,而恰巧我们目标蛋白中是需要的。我和领导说了这一情况,但是他说大肠杆菌是可以合成各种氨基酸的,不会影响目标蛋白的合成的。我有点疑惑的是,
在翻译的时候,由于比较快速而造成大肠杆菌合成这些氨基酸的速度慢,而导致目标蛋白没有合成成功呢?
他说不会的,我的想法是不是很幼稚啊? 而且他一直说发酵没有问题,是纯化和复性的问题。
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1楼
2013-12-23 11:19:09
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zeroon
木虫
(正式写手)
应助: 16
(小学生)
金币: 1893.6
帖子: 350
在线: 68.1小时
虫号: 1906280
★
sophia-yxh(金币+1): 谢谢参与
愿李啸领导总工能想出对策来
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20楼
2014-01-14 22:00:08
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