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kinner.huang

金虫 (正式写手)

[求助] 关于设计引物 已有1人参与

我想研究一个基因的variant,因第8外显子缺失,请问各路大侠,如果想PCR得到的只是这个特定的variant而不是这个基因的其他variants,是否可以设计个引物正好是跨第7和第9外显子的?可否指导一二?谢谢!
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2013-12-19 16:21:17
如果后面还有第9外显子的话就可以设计引物。
一种方法是引物直接跨7、9外显子
另一种方法是在第8外显子两边设计引物,因为缺了一个外显子,扩增片段长度较小。设计适当的PCR产物长度,比如一个基因PCR产物大于500 bp,另外一种PCR产物小于500 bp,就可以从500 bp的marker分辨出2种不同的mRNA。
2楼2013-12-19 11:35:27
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