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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 同源重组基因敲除问题？
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道义宙斯

金虫 (著名写手)

[求助] 同源重组基因敲除问题？ 已有1人参与

我要用同源重组的方法进行基因敲除，就是用一段kan抗性基因替代我的目标基因A，我想同源重组时同源臂的选择是不是要紧紧挨着目标基因一个碱基都不差？ kan抗性的基因会因为同源臂的长短导致移码突变吗？ 如果用kan基因部分替代我的目标基因会达到相同的效果吗？
  请各位大侠帮忙啊！
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1楼 2013-12-13 16:05:05
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lcat

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2013-12-14 23:14:10
道义宙斯(laozuzunzhe代发): 金币+3, 代发一下，贴主记得给有用应助奖励金币哈！ 2013-12-14 23:15:21
不用紧挨目标基因一个不差，没关系的。
同源臂长短跟kan抗性没有关系，因为抗性基因本身就是一个完整的表达盒，含有转录必需元件。
部分替代一般也是可以的，但尽量做全基因替换，以防有的基因部分失活。
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2楼2013-12-14 00:05:24
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道义宙斯

金虫 (著名写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lcat at 2013-12-14 00:05:24
不用紧挨目标基因一个不差，没关系的。
同源臂长短跟kan抗性没有关系，因为抗性基因本身就是一个完整的表达盒，含有转录必需元件。
部分替代一般也是可以的，但尽量做全基因替换，以防有的基因部分失活。

你的解答太精彩了！ 打消了我的顾虑。O(∩_∩)O谢谢！
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3楼2013-12-14 11:30:43
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