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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DGGE预电泳的问题
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donggualily

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE预电泳的问题 已有1人参与

看很多人在DGGE试验中，预电泳是在上样前，那么请问上样时，玻璃板是在电泳槽里面放着吗？还是取出来上样，然后再放回去？
      加完样品之后还需要在用高电压跑一小会儿吗？听说上样后用200V跑10分钟，可以让样品获得一致的电泳条件并且快速进入分离胶。如果在上样前预电泳，那这个目的不就达不到了吗？
     大家说说看，你们平时都是这么做的呢？
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1楼 2013-12-04 15:46:53
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
donggualily: 金币+4, ★★★很有帮助, 感谢应助！盼望继续交流。 2014-01-17 12:39:54
donggualily: 金币+2, ★★★很有帮助, 非常感谢您的指点，期盼更多交流！ 2014-01-21 22:17:24
200V,10min；120V，10min；100V，540min。分别是去干扰、入胶、电泳的作用，也是正规的流程。
。
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爱是浅浅的喜欢，喜欢是浅浅的爱。
2楼2013-12-04 23:05:14
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donggualily

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by asdkingstar at 2013-12-04 23:05:14
200V,10min；120V，10min；100V，540min。分别是去干扰、入胶、电泳的作用，也是正规的流程。
。

我是跑DNA的，预电泳是在上样前还是上样后呢？
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3楼2013-12-14 20:51:34
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dc19900126

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
donggualily: 金币+2, ★有帮助, 感谢应助！ 2014-01-17 12:40:22
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-17 12:46:52
玻璃板在预电泳加热的时候可以先不放进去，等到加热到指定温度时再放进去，不过这样对玻璃板不好，可能会炸裂。可以把玻璃板一起放进去再加热，等加热到指定温度了再点样。
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4楼2013-12-19 14:33:43
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donggualily

金虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by asdkingstar at 2013-12-04 23:05:14
200V,10min；120V，10min；100V，540min。分别是去干扰、入胶、电泳的作用，也是正规的流程。
。

那么预电泳的温度都是60度吗？预电泳时，梳齿会不会变形影响点样啊？
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5楼2014-01-02 17:24:51
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asdkingstar

金虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by donggualily at 2014-01-02 17:24:51
那么预电泳的温度都是60度吗？预电泳时，梳齿会不会变形影响点样啊？...

嗯，是的，先别拔梳子（后面好点样）预电泳10min（200V），然后点样，120V，100V。。。。。都是60度
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爱是浅浅的喜欢，喜欢是浅浅的爱。
6楼2014-01-03 17:44:31
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donggualily

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by asdkingstar at 2014-01-03 17:44:31
嗯，是的，先别拔梳子（后面好点样）预电泳10min（200V），然后点样，120V，100V。。。。。都是60度...

太感谢了。原来不拔梳子就能保持梳齿的形态啊。困惑好久了。
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7楼2014-01-17 12:34:10
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donggualily

金虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by asdkingstar at 2014-01-03 17:44:31
嗯，是的，先别拔梳子（后面好点样）预电泳10min（200V），然后点样，120V，100V。。。。。都是60度...

对了，那拔完梳子后不用洗梳孔吗？万一有碎胶块的残留呢？不影响之后的电泳吗？
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8楼2014-01-17 12:37:00
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asdkingstar

金虫 (正式写手)
引用回帖:
8楼: Originally posted by donggualily at 2014-01-17 12:37:00
对了，那拔完梳子后不用洗梳孔吗？万一有碎胶块的残留呢？不影响之后的电泳吗？...

小心点，就像对你女朋友一样。
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爱是浅浅的喜欢，喜欢是浅浅的爱。
9楼2014-01-19 17:29:44
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donggualily

金虫 (正式写手)
引用回帖:
9楼: Originally posted by asdkingstar at 2014-01-19 17:29:44
小心点，就像对你女朋友一样。...

呵呵，了解了，非常感谢！
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10楼2014-01-21 22:16:26
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