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donggualily

金虫 (正式写手)

[求助] DGGE预电泳的问题已有1人参与

看很多人在DGGE试验中,预电泳是在上样前,那么请问上样时,玻璃板是在电泳槽里面放着吗?还是取出来上样,然后再放回去?
      加完样品之后还需要在用高电压跑一小会儿吗?听说上样后用200V跑10分钟,可以让样品获得一致的电泳条件并且快速进入分离胶。如果在上样前预电泳,那这个目的不就达不到了吗?
     大家说说看,你们平时都是这么做的呢?
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
donggualily: 金币+4, ★★★很有帮助, 感谢应助!盼望继续交流。 2014-01-17 12:39:54
donggualily: 金币+2, ★★★很有帮助, 非常感谢您的指点,期盼更多交流! 2014-01-21 22:17:24
200V,10min;120V,10min;100V,540min。分别是去干扰、入胶、电泳的作用,也是正规的流程。
爱是浅浅的喜欢,喜欢是浅浅的爱。
2楼2013-12-04 23:05:14
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donggualily

金虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by asdkingstar at 2013-12-04 23:05:14
200V,10min;120V,10min;100V,540min。分别是去干扰、入胶、电泳的作用,也是正规的流程。

我是跑DNA的,预电泳是在上样前还是上样后呢?
3楼2013-12-14 20:51:34
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dc19900126

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
donggualily: 金币+2, 有帮助, 感谢应助! 2014-01-17 12:40:22
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-01-17 12:46:52
玻璃板在预电泳加热的时候可以先不放进去,等到加热到指定温度时再放进去,不过这样对玻璃板不好,可能会炸裂。可以把玻璃板一起放进去再加热,等加热到指定温度了再点样。
4楼2013-12-19 14:33:43
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donggualily

金虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by asdkingstar at 2013-12-04 23:05:14
200V,10min;120V,10min;100V,540min。分别是去干扰、入胶、电泳的作用,也是正规的流程。

那么预电泳的温度都是60度吗?预电泳时,梳齿会不会变形影响点样啊?
5楼2014-01-02 17:24:51
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

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5楼: Originally posted by donggualily at 2014-01-02 17:24:51
那么预电泳的温度都是60度吗?预电泳时,梳齿会不会变形影响点样啊?...

嗯,是的,先别拔梳子(后面好点样)预电泳10min(200V),然后点样,120V,100V。。。。。都是60度
爱是浅浅的喜欢,喜欢是浅浅的爱。
6楼2014-01-03 17:44:31
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donggualily

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by asdkingstar at 2014-01-03 17:44:31
嗯,是的,先别拔梳子(后面好点样)预电泳10min(200V),然后点样,120V,100V。。。。。都是60度...

太感谢了。原来不拔梳子就能保持梳齿的形态啊。困惑好久了。
7楼2014-01-17 12:34:10
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donggualily

金虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by asdkingstar at 2014-01-03 17:44:31
嗯,是的,先别拔梳子(后面好点样)预电泳10min(200V),然后点样,120V,100V。。。。。都是60度...

对了,那拔完梳子后不用洗梳孔吗?万一有碎胶块的残留呢?不影响之后的电泳吗?
8楼2014-01-17 12:37:00
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asdkingstar

金虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by donggualily at 2014-01-17 12:37:00
对了,那拔完梳子后不用洗梳孔吗?万一有碎胶块的残留呢?不影响之后的电泳吗?...

小心点,就像对你女朋友一样。
爱是浅浅的喜欢,喜欢是浅浅的爱。
9楼2014-01-19 17:29:44
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donggualily

金虫 (正式写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by asdkingstar at 2014-01-19 17:29:44
小心点,就像对你女朋友一样。...

呵呵,了解了,非常感谢!
10楼2014-01-21 22:16:26
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