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tingspdf

至尊木虫 (著名写手)

[求助] DGGE电泳为什么要预热电泳缓冲液到60度?

如题
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
西瓜(金币+4): Good! 2011-07-05 17:19:29
tingspdf(金币+3): 60度是辅助变性剂让DNA变性吧? 2011-07-05 17:38:44
tingspdf(金币+7): 2011-08-29 21:36:30
引用回帖:
Originally posted by tingspdf at 2011-07-05 15:10:38:
如题

DNA变性

DGGE是一个双重变性的电泳系统,一个是温度60度,一个是胶里的变性剂。
2楼2011-07-05 15:28:01
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)

引用回帖:
Originally posted by xiadongliang at 2011-07-05 15:28:01:
DNA变性

DGGE是一个双重变性的电泳系统,一个是温度60度,一个是胶里的变性剂。

请教下,60度让DNA变性,会不会太低了。我没做过DGGE,不过一般PCR里面的变性温度不是都要到94度吗?还是说您指的“变性”不是说解链?那具体是什么意思呢?
请勿见笑哈
3楼2011-07-05 17:24:17
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tingspdf

至尊木虫 (著名写手)

同问!
4楼2011-07-05 17:38:57
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xiadongliang

金虫 (正式写手)

引用回帖:
Originally posted by 西瓜 at 2011-07-05 17:24:17:
请教下,60度让DNA变性,会不会太低了。我没做过DGGE,不过一般PCR里面的变性温度不是都要到94度吗?还是说您指的“变性”不是说解链?那具体是什么意思呢?
请勿见笑哈

60度,相对于DNA的退火温度来讲的,并不是讲一个温度就让DNA完全变性,而是使得DNA有个变性的趋势。

94度使DNA完全解链了,变性梯度就没有用了。
5楼2011-07-06 08:55:30
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