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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 大神们~~~求PCR指导
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weishunshun

新虫 (小有名气)

[求助] 大神们~~~求PCR指导 已有1人参与

小女已经潜心做分子微生物实验快两个月了~~不断受挫~土壤DNA是用试剂盒提的~~但是腐殖酸浓度较高~~PCR屡试不成功~~最好的情况下是PCR有条带但非常不亮~~一点都不亮~~只能隐约看到有亮带~~后来又手提了一部分~~浓度倒是挺好~但是杂质还是非常多~做了个胶纯化~~然后再做的PCR~倒是能p出来~~但是还不亮~~为神马总是不亮~~~不亮我就做不了DGGE做不了DGGE我就不能往下做~~求大神指点~~~为什么啊~~难道真是人品不行啊~~怎么样人品才能好啊
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苦逼苦逼~~~
1楼 2013-12-03 17:10:12
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

weishunshun

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by zzl2516 at 2013-12-03 17:41:52
marker亮么。。。

marker也不是很亮~~但是比PCR条带亮多了
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苦逼苦逼~~~
3楼2013-12-03 17:44:01
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wubingqi

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
那就适当增加几个循环或是提高下模版量啊
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7楼2013-12-04 08:47:09
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普通回帖

zzl2516

金虫 (小有名气)
marker亮么。。。
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2楼2013-12-03 17:41:52
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一生的约定

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by weishunshun at 2013-12-03 17:44:01
marker也不是很亮~~但是比PCR条带亮多了...

我也要做这些，到现在还没做到这步

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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广交益友，多多学习！
4楼2013-12-03 22:20:14
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yilunanxia

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
楼主有木有测过260/280nm和260nm下的吸光度？
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5楼2013-12-04 08:29:06
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zzl2516

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by weishunshun at 2013-12-03 17:44:01
marker也不是很亮~~但是比PCR条带亮多了...

最好来个图。。。
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6楼2013-12-04 08:31:03
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bikexmx

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
DNA模板稀释几个梯度做做PCR试试，有时候模板浓度低反而PCR的结果较好，楼主可以试试
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前方总有更多挑战，战胜恐惧，勇往向前，加油~~~~
8楼2013-12-04 09:44:12
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小小武

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
应该是PCR过程有问题，要把细节条件再仔细梳理一下，包括温度，时间的设定。有时只是一点点细节的改变，效果就大不同。不要急，慢慢来！

[ 发自小木虫客户端 ]
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爱拼才会赢!
9楼2013-12-04 09:45:50
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sxc2080

金虫 (正式写手)
楼主加油！我也要做这方面的，可是现在还没有咯做，解决不了你的问题了！

[ 发自小木虫客户端 ]
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既然决定了，就要做到最好！！
10楼2013-12-04 13:24:31
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