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新手做的PCR-SSCP,求大神指点啊
为什么胶染色之后全黑了,一点透明度都没有了啊,谁能告诉我是什么原因吗?我以前只染过DGGE的胶,但是都不
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2013-04-10 15:21:12
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13楼
:
Originally posted by
Eileenliao
at 2013-04-15 18:46:23
哦,这样,楼主跑SSCP用什么染色呢,我用的是银染,觉得染色挺麻烦的...
我已经找到原因啦,嘿嘿
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14楼
2013-04-15 21:36:57
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2013-04-10 16:48:18
你这是没有实际操作好,关注一下试验原理,自行检查
为了便于观察分析结果,PCR扩增体系中常加入a-32P dNTP标记PCR产物,电泳后放射自显影观察泳动带的位置。目前也常用银染法来染色聚丙烯酰胺凝胶上的DNA泳动带,此方法可避免同位素的污染及对操作者的辐射损伤,但其灵敏度不如用同位素标记。
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2楼
2013-04-10 15:39:19
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2楼
:
Originally posted by
leisure797
at 2013-04-10 15:39:19
你这是没有实际操作好,关注一下试验原理,自行检查
为了便于观察分析结果,PCR扩增体系中常加入a-32P dNTP标记PCR产物,电泳后放射自显影观察泳动带的位置。目前也常用银染法来染色聚丙烯酰胺凝胶上的DNA泳动带, ...
你是来赚金币的啊,我要是知道,我就不问了
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3楼
2013-04-10 17:04:15
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你最后显影的时候肯定是碱量太多了,导致整个胶都是黑色的了。
你要检查一下你的染色的盒子是否清洗干净,在什么地方有可能碰到碱溶液或碱的残留。
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4楼
2013-04-10 17:57:43
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补充一下,显影的盒子里如果也含有大量的碱液,肯定会一下子就变黑的。
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5楼
2013-04-10 17:58:25
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5楼
:
Originally posted by
genolab
at 2013-04-10 17:58:25
补充一下,显影的盒子里如果也含有大量的碱液,肯定会一下子就变黑的。
我都是洗干净的啊,而且显色的时候不是就要加氢氧化钠吗?
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6楼
2013-04-10 19:48:09
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用量会不会出问题了?
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2013-04-11 11:37:55
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7楼
:
Originally posted by
xiadongliang
at 2013-04-11 11:37:55
用量会不会出问题了?
比如说什么用量啊?
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8楼
2013-04-11 12:57:19
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2013-04-11 13:24:03
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1.6%多吗?不多吧
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