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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

[求助] 新手做的PCR-SSCP,求大神指点啊

为什么胶染色之后全黑了,一点透明度都没有了啊,谁能告诉我是什么原因吗?我以前只染过DGGE的胶,但是都不会染成这样子

IMG_2501.JPG
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堍仔

至尊木虫 (文坛精英)

优秀版主

引用回帖:
2楼: Originally posted by leisure797 at 2013-04-10 15:39:19
你这是没有实际操作好,关注一下试验原理,自行检查
为了便于观察分析结果,PCR扩增体系中常加入a-32P dNTP标记PCR产物,电泳后放射自显影观察泳动带的位置。目前也常用银染法来染色聚丙烯酰胺凝胶上的DNA泳动带, ...

你是来赚金币的啊,我要是知道,我就不问了
3楼2013-04-10 17:04:15
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leisure797

铁杆木虫 (职业作家)

百里登风

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+2, 鼓励积极交流经验 2013-04-10 16:48:18
你这是没有实际操作好,关注一下试验原理,自行检查
为了便于观察分析结果,PCR扩增体系中常加入a-32P dNTP标记PCR产物,电泳后放射自显影观察泳动带的位置。目前也常用银染法来染色聚丙烯酰胺凝胶上的DNA泳动带,此方法可避免同位素的污染及对操作者的辐射损伤,但其灵敏度不如用同位素标记。
笑一个!
2楼2013-04-10 15:39:19
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genolab

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你最后显影的时候肯定是碱量太多了,导致整个胶都是黑色的了。
你要检查一下你的染色的盒子是否清洗干净,在什么地方有可能碰到碱溶液或碱的残留。
4楼2013-04-10 17:57:43
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genolab

金虫 (著名写手)


【答案】应助回帖

补充一下,显影的盒子里如果也含有大量的碱液,肯定会一下子就变黑的。
5楼2013-04-10 17:58:25
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