| 查看: 2483 | 回复: 9 | |||
[求助]
提取RNA时，有谁用过水饱和酚配试剂吗？几个提取相关问题，求帮助啊！
|
|
新人最近提植物的RNA，老板指定用一个新改进的CTAB/酸酚法。有几处不懂的地方想问问提取RNA的前辈们~~回答有用的话有金币啦，请大家帮帮忙啊！！~ 1 方法文献里面是：Extraction buffer II Acidic phenol (pH 4.5) (Sigma,USA), 2.5 M sodium chloride (Sigma, USA), 0.5% SDS. 这是用水饱和酚做缓冲液Ⅱ的溶剂的意思吗，要配置100ml的缓冲液Ⅱ，就吸取100ml水饱和酚，直接向里面加入NaCl和SDS溶解就行了？ 水饱和酚是吸取下层使用吗？最后配好缓冲液后，用吸取一些原来水饱和酚的上层保护液进行保护吗？ 2 缓冲液Ⅰ是：CTAB, 2% (w/v)；3.5 M 硫氰酸胍 (GTC)；100 mM 柠檬酸缓冲液 (pH 4.5)；3 M 醋酸钾；1.0% 十二烷基磺酸钠 (SDS) (使用前加入)；RNase-free水定容。 想问问大家，配含有CTAB的试剂时，是不是应该最后加CTAB？否则配出来的试剂最上面会有一层白色的沫，感觉像是CTAB不溶，即便摇匀也一会儿就又分层了。 3 最后是配好的试剂用高压灭菌吗？异硫氰酸胍和水饱和酚都不稳定，都不能灭吧？就只剩下 LiCl能灭一下了。 |
回复此楼» 猜你喜欢
0703化学/290求调剂/本科经历丰富/工科也可
已经有11人回复
-
南京大学化学调剂
已经有15人回复
-
292求调剂
已经有4人回复
-
材料专硕调剂
已经有8人回复
-
085601材料工程找调剂
已经有17人回复
-
面上5B能上会吗？
已经有6人回复
-
化学308分调剂
已经有7人回复
-
化学工程085602 305分求调剂
已经有25人回复
-
求化学调剂
已经有11人回复
-
085602 化学工程专硕 340分求调剂
已经有3人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 酚氯仿法提取DNA的原理
已经有29人回复
- RNA提取及电泳问题（附图），虫友们能否帮我分析下啊~~
已经有15人回复
- Trizol 法 RNA提取失败 请虫友帮忙分析下 什么原因?该怎么办吖
已经有18人回复
- 求助苯酚氯仿发提取DNA
已经有11人回复
- DNA和RNA同时提取
已经有5人回复
- trizol试剂提取细胞内总RNA时，加入试剂后一定要在4度下离心吗？
已经有6人回复
- 新手用试剂盒提取植物RNA时的一些小问题
已经有21人回复
- 每次DNA提取后检测结果都如图，连着好几天了，为什么？？？？
已经有14人回复
- 提取RNA的试剂盒哪家的好？
已经有15人回复
- 如何用trizol试剂保存RNA提取材料？请各位前辈指点指点，不甚感激！
已经有14人回复
- Qiagen（MOBIO）土壤、血液、水样、植物、粪便、组织细胞DNA/RNA提取试剂盒
已经有614人回复
- 虫友们，有谁用过杭州宝赛生物公司的rna提取试剂盒啊，效果怎么样啊？
已经有6人回复
- 求助：酚氯仿抽提的DNA，吸光曲线峰值总是在270nm附近
已经有11人回复
- 植物RNA提取试剂盒
已经有9人回复
- 为什么提取的DNA总是降解？
已经有41人回复
- 【求助/交流】酚、氯仿法提取细菌DNA的试剂配制问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】如何使用水饱和酚？
已经有9人回复
- 【求助/交流】想问问天根植物总RNA提取试剂盒的使用
已经有9人回复
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
liangpz: 金币+5, ★有帮助 2013-11-26 15:44:59
感谢参与，应助指数 +1
liangpz: 金币+5, ★有帮助 2013-11-26 15:44:59
|
楼主这方法就是异硫氰酸胍的提RNA方法，是很成熟的一种提法，是我们实验室通用的，我经常用这个方法，很好用，我发给你吧。你看了还有问题再问。 百度网盘链接http://pan.baidu.com/s/1zPclO |
2楼2013-11-25 22:15:43
3楼2013-11-26 15:44:15
4楼2013-11-27 08:37:55
5楼2013-11-27 09:18:02
感谢参与，应助指数 +1
|
本帖内容被屏蔽 |
6楼2013-11-27 11:21:16
7楼2013-11-27 15:12:11
8楼2013-11-27 15:16:05
sz123321
木虫 (正式写手)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 2884.8
- 散金: 500
- 红花: 2
- 帖子: 465
- 在线: 39.5小时
- 虫号: 3527971
- 注册: 2014-11-09
- 专业: 生物信息学
9楼2014-11-15 22:08:03
|
本帖内容被屏蔽 |
10楼2020-10-13 11:38:13
10