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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】+ 如何扩增GC含量高的外显子
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costume2

新虫 (初入文坛)

[求助] 【求助/交流】+ 如何扩增GC含量高的外显子

我需要扩增1个基因的1号外显子，但是这段外显子的GC含量有70%，我设计了几对引物，采用常规PCR，均没有P出来，应该怎么办呢？
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1楼 2013-11-08 19:31:05
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blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
Takara的 Primer STAR  + 2X HS GC BUFFER 应该能扩出来！
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jiayoubashaonian
6楼2013-11-11 16:16:22
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yb19841014

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-09 01:35:35
建议加入DMSO  甘油 甜菜碱  具体浓度可以查找文献
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2楼2013-11-08 21:49:27
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plantvirus

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
换高GC buffer，大连宝生物就有。如果不差钱，就用thermo 的phusion。
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Imaginationismoreimportantthanknowledge！
3楼2013-11-09 02:20:50
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plantvirus

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

Phusion High-Fidelity DNA Polymerases 这个酶，里面带着GC buffer
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Imaginationismoreimportantthanknowledge！
4楼2013-11-09 02:22:49
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