应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 做western blotting时，抗体稀释倍数对结果影响大吗？
51/1返回列表
查看: 3300  |  回复: 6
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

bb123456789

金虫 (正式写手)

[交流] 做western blotting时，抗体稀释倍数对结果影响大吗？

这段时间在做western blotting，样品是各个组织的总蛋白。前两次做一抗分别按1:6000和1:8000稀释的，后两次做用的1:10000.前两次做有结果，只是背景复杂，后两次没结果也看不到任何杂带。请大家帮忙分析分析吧。

第一个泳道是蛋白质marker，最后一个是纯化蛋白，中间是各组织样品。
做western blotting时，抗体稀释倍数对结果影响大吗？
20131104_213436.jpg


做western blotting时，抗体稀释倍数对结果影响大吗？-1
20131104_213336.jpg
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

» 抢金币啦！回帖就可以得到:

查看全部散金贴
1楼 2013-11-04 21:41:09
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bingdong05

银虫 (正式写手)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
bb123456789: 金币+1 2013-11-06 09:34:17
引用回帖:
3楼: Originally posted by w雨过天晴j at 2013-11-05 09:29:18
请问一下，背景很重是什么意思？...

杂带很多，另外，三楼兄弟的提议你也要注意哈
赞一下 回复此楼
5楼2013-11-05 09:33:21
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答

bingdong05

银虫 (正式写手)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:56:47
bb123456789: 金币+1, 是一抗孵育后多洗几次还是一抗二抗孵育后均多洗几次呢 2013-11-06 09:21:33
影响很大的，稀释倍数过低，背景很重，倍数过高的话一般条带较清晰，以前做的时候我都是按照1：10000稀释（说明书貌似建议6000，具体不记得了哈），楼主可以试着稀释8000左右，多洗涤几次，多洗涤几次，若是背景还是很杂，再放大稀释倍数
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-11-05 09:26:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

w雨过天晴j

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by bingdong05 at 2013-11-05 09:26:45
影响很大的，稀释倍数过低，背景很重，倍数过高的话一般条带较清晰，以前做的时候我都是按照1：10000稀释（说明书貌似建议6000，具体不记得了哈），楼主可以试着稀释8000左右，多洗涤几次，多洗涤几次，若是背景还是 ...

请问一下，背景很重是什么意思？
赞一下 回复此楼
3楼2013-11-05 09:29:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-11-05 11:56:53
bb123456789: 金币+1, 非常感谢 2013-11-06 09:22:35
可能你的目标蛋白的丰度不是很高，所以组织样品没有信号。但能测到纯化蛋白的信号，说明抗体工作，最好增加样品上样量并稀释纯化蛋白。一抗的稀释倍数当然比较重要，你的情况应该适当减少稀释倍数。
赞一下 回复此楼
4楼2013-11-05 09:31:29
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 7 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 湖南大学刘巧玲课题组2026年第二批次博士研究生招生信息 +3 南风观火 2026-04-18 3/150 2026-04-19 21:44 by 淡雅人生27
[考研] 289 分105500药学专硕求调剂(找B区学校) +5 白云123456789 2026-04-13 5/250 2026-04-19 18:12 by Equinoxhua
[考研] 291求调剂 +11 关忆北. 2026-04-14 11/550 2026-04-19 17:16 by 中豫男
[考研] 求调剂推荐 +9 小聂爱学习 2026-04-14 9/450 2026-04-19 17:03 by 中豫男
[考研] 求调剂 +10 小聂爱学习 2026-04-16 12/600 2026-04-19 16:51 by 中豫男
[论文投稿] 有没有接收比较快的sci期刊呀，最好在一个月之内的，研三孩子求毕业 20+4 之护着 2026-04-16 6/300 2026-04-19 13:00 by Aaron_zyn
[考研] 0854求调剂 +23 门路摸摸 2026-04-15 27/1350 2026-04-19 01:59 by 烟雨流涯
[考研] 一志愿沪9，326求生物学调剂 +12 刘墨墨 2026-04-13 12/600 2026-04-18 23:31 by 路病情
[考研] 生物学调剂 +10 纸扇zhishan 2026-04-13 10/500 2026-04-18 21:19 by zqndavala
[考研] 接受任何调剂 +6 也就是栗子 2026-04-17 7/350 2026-04-18 17:20 by 涵竹刘
[考研] 22408 312求调剂 +24 门路摸摸 2026-04-14 26/1300 2026-04-18 13:04 by wunaiy88
[考研] 收到复试调剂但是去不了 +8 小蜗牛* 2026-04-16 8/400 2026-04-18 11:15 by zixin2025
[考研] 急需调剂 +9 绝不放弃22 2026-04-15 10/500 2026-04-18 08:09 by chixmc
[考博] 申博/考博 +3 啃面包的小书虫 2026-04-17 4/200 2026-04-17 23:54 by 阳阳阳^_^
[考研] 一志愿华中农业071010，320求调剂 +17 困困困困坤坤 2026-04-14 19/950 2026-04-17 20:08 by 关一盏灯cd
[考研] 322求调剂 +6 tekuzu 2026-04-17 6/300 2026-04-17 13:48 by Espannnnnol
[考研] 297，工科调剂?河南农业大学本科 +14 河南农业大学-能 2026-04-14 14/700 2026-04-16 14:41 by dingyanbo1
[考研] 药学求调剂 +14 喽哈加油 2026-04-14 16/800 2026-04-16 10:15 by beilsong20
[考研] 求调剂学校 +14 不会吃肉 2026-04-13 16/800 2026-04-15 21:59 by noqvsozv
[考研] 考研调剂 +13 长弓傲 2026-04-13 14/700 2026-04-14 14:44 by zs92450
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭