24小时热门版块排行榜    

查看: 2503  |  回复: 5
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

[求助] 原生动物DNA提取及PCR问题 已有1人参与

我现在做分子,材料是一种原生动物,按照文献的方法single specimen提的DNA就足够PCR扩增用的,但是没有说DNA浓度是多少。
我提的DNA最大浓度96ng/ul,模板量是4ul,但是PCR除了marker条带就什么也没有了,现在就很头疼不知道是模板浓度太低还是其他原因。想问问哪位前辈也做原生动物的,PCR成功的,您提的DNA浓度最大和最小有多少。
新手上路,问题多多,多谢指教!
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

感兴趣的

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

越努力越幸运
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

安小米

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

你这个模板浓度可以了,但是你的模板PCR之前跑过电泳检测没有啊?
另外引物是否合适?
6楼2014-07-03 14:41:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 6 个回答

zhouxiaofei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-10-31 09:47:49
提取主要是考虑DNA的纯度,质量如何?一般的PCR浓度在100ng-1000ng,主要取决于用的那种酶。建议用那种对模版质量要求不高的,就比较合适。还有引物建议优化。
2楼2013-10-31 09:19:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

柠檬可乐星

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by zhouxiaofei at 2013-10-31 09:19:04
提取主要是考虑DNA的纯度,质量如何?一般的PCR浓度在100ng-1000ng,主要取决于用的那种酶。建议用那种对模版质量要求不高的,就比较合适。还有引物建议优化。

您说使用对模板质量要求不高的酶,比如是什么呢?我一直用的东盛的Taq酶,您觉得有问题么?
谢谢!
越努力越幸运
3楼2013-11-01 08:10:20
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhouxiaofei

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
柠檬可乐星: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-11-03 10:42:00
比如NEB 的longAmp@ Taq,M0323S,我们用的感觉不错。做鼠尾DNA提取PCR也还不错。
4楼2013-11-01 10:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +12 羊腰板 2026-08-21 12/600 2026-08-23 07:40 by ma0526
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +4 简单化xn 2026-08-22 8/400 2026-08-23 07:20 by ilovexiaobin
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +10 kulium 2026-08-21 13/650 2026-08-21 21:58 by alongwaytogo
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 让我中一个面上吧! +11 大萍1987 2026-08-20 13/650 2026-08-21 14:48 by 20120902066
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
信息提示
请填处理意见