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黑曲霉原生质体制作只见断裂菌丝而无原生质体 已有1人参与
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做了几次黑曲霉原生质体都没有成功，着实郁闷。 在ME液体培养基里接种孢子，培养16小时收集菌球。试了裂解酶、蜗牛酶、纤维素酶的混合液，用1.0M和1.2M山梨醇做渗透压稳定剂，100rpm裂解2-3小时，培养基里有很多裂解下来的长条菌丝，但是看不到圆圆的原生质体。酶解4-5小时，菌丝被裂解得很短了，还是没有原生质体。 请教有经验的大侠，是不是如果渗透压合适，只要菌丝断裂，断裂处就应该释放原生质体？我的实验是酶的用量的问题还是渗透压的问题？ 我也看了论坛的帖子，试了一下研磨菌球再制作原生质体，可是研磨后孢子也分散在培养基里，即便有原生质体形成，也无法将两者区分。 |
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