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汕头大学海洋科学接受调剂
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yinxian

新虫 (著名写手)

[求助] 黑曲霉原生质体制作只见断裂菌丝而无原生质体 已有1人参与

做了几次黑曲霉原生质体都没有成功,着实郁闷。
在ME液体培养基里接种孢子,培养16小时收集菌球。试了裂解酶、蜗牛酶、纤维素酶的混合液,用1.0M和1.2M山梨醇做渗透压稳定剂,100rpm裂解2-3小时,培养基里有很多裂解下来的长条菌丝,但是看不到圆圆的原生质体。酶解4-5小时,菌丝被裂解得很短了,还是没有原生质体。
请教有经验的大侠,是不是如果渗透压合适,只要菌丝断裂,断裂处就应该释放原生质体?我的实验是酶的用量的问题还是渗透压的问题?
我也看了论坛的帖子,试了一下研磨菌球再制作原生质体,可是研磨后孢子也分散在培养基里,即便有原生质体形成,也无法将两者区分。
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yinxian

新虫 (著名写手)

问题已解决,调整酶浓度配比。圆嘟嘟的原生质体,很可爱啊。
2楼2013-11-01 10:26:38
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绛洞花王

铜虫 (初入文坛)

请问一下:您用的山梨醇稳定剂最终选择什么浓度呀?还有您用的酶浓度比是什么浓度比呀??非常感谢!!^_^
学无止境!
3楼2014-02-25 17:38:51
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yinxian

新虫 (著名写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 绛洞花王 at 2014-02-25 17:38:51
请问一下:您用的山梨醇稳定剂最终选择什么浓度呀?还有您用的酶浓度比是什么浓度比呀??非常感谢!!^_^

1M 山梨醇,酶用了溶壁酶、几丁质酶、纤维素酶。
4楼2014-02-27 15:19:22
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绛洞花王

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by yinxian at 2014-02-27 15:19:22
1M 山梨醇,酶用了溶壁酶、几丁质酶、纤维素酶。...

非常感谢!!^_^
学无止境!
5楼2014-02-28 08:10:56
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sophia7168

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

求问楼主,你的山梨醇是加到酶液里面的么,各种酶浓度配比是多少?
6楼2015-08-20 21:37:55
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俊俊思密达

新虫 (小有名气)

ME培养基配方能给一下那

发自小木虫IOS客户端
7楼2018-04-20 16:23:32
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