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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 原生质体单核化问题 急求！！！！！
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acnotlove

银虫 (小有名气)

[求助] 原生质体单核化问题 急求！！！！！

我做的是真姬菇的原生质体制备，准备原生质体再生后挑取单核菌株~

在制备过程中都在无菌条件下操作，用的是0.6M的甘露醇做稳渗剂，2%溶壁酶，再生培养基选用：麦芽糖0.5% 酵母0.5% 葡萄糖1% 甘露醇0.6M 琼脂2% 这次破壁时间大约三个多小时，才三天就长出这些小点点了，点看去很弱，怎么回事，我看文献都说原生质体的再生培养要将近一周的时间，芒状的吗，可是我这才三天就长了，这个是原生质体呢还是孢子，或是菌丝？ 哪位大侠高手给我指点一下吧，万分感谢诶！！！！！！！
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1楼 2011-08-13 10:38:51
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niuniu1973

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励应助 2011-08-13 21:31:30
原生质体制备时镜检了吗，过滤去除菌丝了吗，可将过滤后的原生质体用SDS处理，接种于再生培养基上与不经SDS处理相比较，SDS处理后原生质体破裂，不能生长；也可将原生质体接种于非高渗的普通培养基上，与再生培养基上生长状况比较，如果在普通培养基上也生长，则有菌丝体存在。
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2楼2011-08-13 13:41:50
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acnotlove

银虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by niuniu1973 at 2011-08-13 13:41:50:
原生质体制备时镜检了吗，过滤去除菌丝了吗，可将过滤后的原生质体用SDS处理，接种于再生培养基上与不经SDS处理相比较，SDS处理后原生质体破裂，不能生长；也可将原生质体接种于非高渗的普通培养基上，与再生培养 ...

镜检了，有看到原生质体，但没有用SDS处理，我是用稳渗剂洗两遍后用再生液体培养基洗一遍，然后在加入再生液体培养基后静置30分钟后去一毫升稀释后涂平板的
没有进行对照处理~
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3楼2011-08-15 12:49:29
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niuniu1973

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

做个对照吧，你就知道了是不是菌丝的污染了，任何时候实验中的对照都很重要，
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4楼2011-08-16 13:40:15
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