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wangliually

新虫 (初入文坛)

[交流] 植物DNA抽提时有多糖污染 已有1人参与

各位大虾,我在对植物进行DNA抽提时含有多糖抽提不干净,希望帮忙指教。
我提取的是大米粉的DNA,采用的方法是CTAB法,具体如下:
0.1大米粉在1ml CTAB溶液(国标法配置)中65℃温浴30min,再加蛋白酶K继续温浴30min。
离心, 取上清。
加入氯仿除蛋白,离心,取上层水相。
加0.6倍体积的异丙醇和0.1倍体积3M醋酸钠,室温静置20min ,离心,弃上清。
加70%乙醇洗涤。离心,弃上清。
室温干燥3-5min后加TE溶解。
可是,提取效果很差,260/280在1.8-1.9之间,但260/230却在0.6-0.8之间。
且电泳图如附件。请问我提取的样品是否是有多糖污染呢?   有什么解决办法?
植物DNA抽提时有多糖污染
20131017.jpg
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wangliually

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by rainbaiyun at 2013-10-22 09:56:38
多糖多酚的DNA提取确实不容易,可以选择一些专门针对这类样品的抽提试剂盒,效果好些,主要是裂解液配方不同。

我现在想的是可以怎样改进  试剂盒毕竟太贵 我们 长期使用不合算
3楼2013-10-24 15:18:06
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rainbaiyun

新虫 (初入文坛)

多糖多酚的DNA提取确实不容易,可以选择一些专门针对这类样品的抽提试剂盒,效果好些,主要是裂解液配方不同。
2楼2013-10-22 09:56:38
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