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zhouyangjue

银虫 (小有名气)

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[求助] 看看咱这个电泳图，菜鸟根本不懂。。

普通凝胶电泳图，三个2000的mark，目的片段630左右，用的PCR引物GC-341f和907r，PCR条件为
94 ℃预变性 5min；接下来是 94 ℃变性 30 s，50 ℃退火 30 s，72 ℃延伸 1 min，30 个循环；72 ℃延伸 10 min，最后 4 ℃保温。
PCR体系为50ul。引物浓度为0.4umol/L。其他的酶、dNTP、和镁离子都是买的混合好的。大家帮我看下我这个是怎么回事，我接下来想做DGGE。
问题1：这个电泳图胶有没有问题，出现这个样子是什么原因啊。
问题2：目的条带位置是对的，想知道后面那些东西是什么？
问题3：接下来是要做DGGE的，这样有没有影响，是否需要重新进行PCR，重新进行的话应该如何调整。
希望大家可以指导我一下，师兄没有做的，独自摸索，望得到指导。问题可能有点菜，希望大家不要介意，耐心解答。

Image9.jpg

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1楼2013-10-21 09:28:24

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黑盖儿

铁虫 (小有名气)

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Les_書t

铜虫 (初入文坛)

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