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SSR PCR 聚丙烯酰胺凝胶电泳条带问题
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各位大神大家好，我是做黄瓜基因定位的，用QTL法。之前筛选亲本多态性引物时候没出现什么问题，现在用这些引物跑F2群体时候，各种问题……我用的是小板子，非变性聚丙酰胺凝胶电泳，150V-180V电压，2-3h。之前的引物是自己挑的退火温度，条带是这样的：对于F2来说条带是不是有点多啊？我的引物大小基本都在150-250bp之间，Marekr用的是20-500bp的，最左侧两个是亲本。可是昨天我用同样的方法和药品跑出来的却是这样的：条带怎么都在上面啊？180V，2个多小时，缓冲液也是新配的……连Marker都不清楚。两次只有引物和PCR程序不一样，可是我同学用的相同药品和程序，引物也差不多，只有DNA模板不一样，人家每次跑的可好了。我着急毕业啊，拜托各位大神帮帮我，谢谢啦…… SSR21186.JPG  IMG_2041.JPG |
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