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lanlanbetty

金虫 (初入文坛)

[求助] Tricine SDS-PAGE-溴酚蓝比蛋白跑得快

我最近在做Tricine SDS-PAGE,使用SDS-PAGE的样品缓冲溶液,使用16.5%分离胶(AB-6,加尿素和不加尿素),10%夹层胶(AB-6),4%浓缩胶(AB-6与AB-3),先30V跑1h,100V跑至电泳结束(约4h),使用考马斯亮蓝R-250染色并脱色后发现条带都集中与夹层胶与分离胶的上部,之后有使用15.5%分离胶(AB-6),10%夹层胶(AB-3),4%浓缩胶(AB-3)做相同试验,也出现类似结果,真心很上火,有木有大侠出现过类似的情况,指导小妹一下,不胜感激啊
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ammingzhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

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lanlanbetty: 金币+5, 有帮助 2013-10-29 12:20:08
是不是你的原料分子量太大,分离胶浓度太高,跑不进分离胶里面去,建议查阅下文献,看看分离胶浓度是不是合适。
心怀感恩
2楼2013-10-12 09:34:48
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