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lanlanbetty

金虫 (初入文坛)

[求助] Tricine SDS-PAGE-溴酚蓝比蛋白跑得快

我最近在做Tricine SDS-PAGE，使用SDS-PAGE的样品缓冲溶液，使用16.5%分离胶（AB-6，加尿素和不加尿素），10%夹层胶（AB-6），4%浓缩胶（AB-6与AB-3），先30V跑1h，100V跑至电泳结束（约4h)，使用考马斯亮蓝R-250染色并脱色后发现条带都集中与夹层胶与分离胶的上部，之后有使用15.5%分离胶（AB-6），10%夹层胶（AB-3），4%浓缩胶（AB-3）做相同试验，也出现类似结果，真心很上火，有木有大侠出现过类似的情况，指导小妹一下，不胜感激啊
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1楼 2013-10-12 08:56:25
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ammingzhi

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lanlanbetty: 金币+5, ★有帮助 2013-10-29 12:20:08
是不是你的原料分子量太大，分离胶浓度太高，跑不进分离胶里面去，建议查阅下文献，看看分离胶浓度是不是合适。
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心怀感恩
2楼2013-10-12 09:34:48
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