应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » PCR的操作应注意什么？
51/1返回列表
查看: 1796  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

CS—园艺

新虫 (初入文坛)

[交流] PCR的操作应注意什么？

做了几次PCR都做不出来，RT—PCR做不出来，当我尝试用DNA做PCR的时候可以做出来了，但之后做DNA PCR由做不出来了，试剂是没有问题的。我整个过程在冰浴上做，会不会是这里出了问题？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-09-29 09:49:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feilinshiji

银虫 (小有名气)
★ ★
CS—园艺(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-29 19:51:15
亲，影响PCR的因素太多了，比如引物的设计、模板的提取、反应条件的设置等等，你说的太笼统了，没法确定究竟是哪儿出了问题
赞一下 回复此楼
4楼2013-09-29 10:49:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

CS—园艺

新虫 (初入文坛)
试剂        剂量
无菌水        39μl
10×buffer        5 μl
dNTP（10mmol/L）        1 μl
引物ALF171697        1 μl
引物ALF171698        1 μl
CDNA        2 μl
B Taq酶（含Mg2+）        1 μl
总和
50 μl
赞一下(1人) 回复此楼
3楼2013-09-29 10:06:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

北极胖熊

新虫 (小有名气)
★ ★
CS—园艺(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-29 20:24:34
cDNA电泳一下看是否有东西,试剂没问题,引物没问题肯定就是模板有问题
赞一下 回复此楼
6楼2013-09-29 15:20:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yinerde

铜虫 (小有名气)
★ ★
CS—园艺(金币+1): 谢谢参与
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖交流！ 2013-09-29 20:24:41
个人觉得是不是dNTP加的有点少呢，我们实验室25ul体系加4uldNTP（Takara公司现成试剂，忘了浓度是多少了）
赞一下 回复此楼
7楼2013-09-29 16:37:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
简单回复
求不重复2楼
2013-09-29 09:53   回复  
CS—园艺(金币+1): 谢谢参与
缩++影: 金币-1, 专业版块请认真回答问题，谢绝灌水，谢谢合作！ 2013-09-29 10:11:18
查看全部 9 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 8/400 2026-08-25 05:12 by BZKMTicpDhFj
[考博] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 0XLacIJUOj8D 2026-08-24 3/150 2026-08-25 01:47 by BZKMTicpDhFj
[基金申请] 明天应该可查了！？ +5 chengyan1220 2026-08-23 5/250 2026-08-24 23:28 by 我4大白菜
[基金申请] 人气不行了 +10 fansofjerry 2026-08-21 10/500 2026-08-24 21:03 by zhanghaozhu
[基金申请] 2026国自然函评费到账 +17 羊腰板 2026-08-21 19/950 2026-08-24 16:52 by iaeyuan
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +13 kulium 2026-08-21 16/800 2026-08-24 16:27 by superceng
[基金申请] 估计是周四 +4 archvillain 2026-08-18 4/200 2026-08-24 13:53 by zzuzxg
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +6 炎黄贵胄 2026-08-22 7/350 2026-08-24 11:58 by 6543yes
[基金申请] 让我中一个面上吧！ +13 大萍1987 2026-08-20 16/800 2026-08-24 10:23 by 太傻了
[基金申请] 放榜前的不淡定 20+4 snowwithsea 2026-08-19 17/850 2026-08-24 10:20 by echo8914667
[基金申请] 科研孤儿太难了 +18 我4大白菜 2026-08-20 19/950 2026-08-24 09:47 by 凯恩广盛催化分�
[基金申请] 什么时候开奖？ +10 CrisMessi 2026-08-18 11/550 2026-08-24 06:50 by 开心的小狮子
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +4 process2012 2026-08-23 5/250 2026-08-23 19:58 by jurkat.1640
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 时间戳今天，20号变了 +5 archvillain 2026-08-20 5/250 2026-08-22 06:12 by hui_daxiao
[基金申请] 看来今天不会放榜了？ +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 应该是下周三26日公布了吧？ +4 哈哈蛤？ 2026-08-21 4/200 2026-08-21 10:58 by Vivilian
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 明天放榜？ +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭