| 查看: 1293 | 回复: 2 | |||
XLK2011木虫 (正式写手)
|
[求助]
多重PCR，共有四个位点扩增，其中有一个位点的扩增效率很低，应该怎么调整反应体系？
|
| 多重PCR，共有四个位点扩增，其中有一个位点的扩增效率很低。单独就这一个位点做单重PCR，扩增曲线还可以，多重PCR时，就很差，应该怎么调整反应体系？ |
回复此楼» 猜你喜欢
留学--博士招生
已经有16人回复
-
化学工程，本211，求调剂，ab区不限
已经有4人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有264人回复
-
湖北师范大学招调剂啦
已经有7人回复
-
邵阳学院食品与化学工程学院硕士调剂
已经有0人回复
-
天津商业大学 生物与医药课题组招生
已经有0人回复
-
生物化工学硕招收调剂
已经有0人回复
-
广东石油化工学院2026年硕士研究生需要多名生物，制药工程，食品专业的调剂生
已经有0人回复
-
317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂
已经有6人回复
-
化工申博
已经有3人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助师兄师姐~有关于巢式PCR的问题~~help
已经有11人回复
- 荧光定量PCR扩增效率低
已经有16人回复
- 我做的定点突变一个位点，PCR无条带。。求高人指点。。
已经有9人回复
- 进行点突变的pcr，不能扩增出产物
已经有3人回复
- PBI121载体转化拟南芥，Tail-PCR扩增整合位点侧翼序列，为何只扩增得到载体部分序列？
已经有16人回复
- 做了几次PCR CT值都有变化怎么办？谢谢大家！！
已经有19人回复
- PCR扩增出现的问题
已经有9人回复
- 关于real-time PCR温度优化的问题
已经有6人回复
- 【求助/交流】PCR引物设计出来了，但酶切之后电泳没条带啊
已经有18人回复
- 【分享】荧光定量PCR实验指南（一）
已经有20人回复
- 【专题】PCR实验技术指南
已经有535人回复
【答案】应助回帖
★
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-25 15:43:19
感谢参与，应助指数 +1
myprayer: 金币+1, 赠人玫瑰，手有余香。分子生物期待你更多精彩 。 2013-09-25 15:43:19
|
单独扩增曲线OK，说明引物设计没有问题。而多重扩增出现一个点较弱，就体系而言，我建议： 1.增加那个较"弱"的点的引物量，或者/并且减少"强"点的引物量，这点比较难把握，因为不同基因序列相对的引物终浓度有明显的差异 (0.04–0.6 μ M) ，这很大程度上取决于经验。 2.至于其它的组分，如dNTP,MgCl2,Buffer,模板和酶甚至佐剂我都认为没有优化的必要。 你只是提问了“反应体系”，说明你对PCR循环参数什么的很有信心，我也就不画蛇添足了。 祝好运。 |
2楼2013-09-25 10:23:56
3楼2016-01-20 08:44:16
