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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 质粒或者胶回收试剂盒最后一步洗脱时用的是试剂盒自带的TE buffer还是去离子水
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xy656691

金虫 (正式写手)

[交流] 质粒或者胶回收试剂盒最后一步洗脱时用的是试剂盒自带的TE buffer还是去离子水

质粒提取或者胶回收的试剂盒里面都有自带的TE buffer用来最后一步洗脱质粒或者基因。大家都是用TE buffer还是用加热的去离子水洗脱的？哪个洗脱效率更高？TE buffer 里面的离子会不会对接下来的PCR或者酶切造成影响？
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1楼2013-09-14 17:30:00
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han3028730

新虫 (初入文坛)
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xy656691: 金币+8, 稀释10倍，好方法。 2013-09-15 17:12:09
137167741: 金币+2, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-15 21:11:27
对了，还有最后一个问题，就是TE buffer会不会对之后的酶切造成影响。答案是TE buffer中的EDTA成分可能会对某些需要金属离子工作的内切酶造成影响，因为EDTA是一种金属螯合物，所以我洗脱的时候是将TE buffer稀释10倍，相当于稀释了EDTA，减小其对之后实验的影响。
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4楼2013-09-14 19:20:09
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张力民1598

铜虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
xy656691: 金币+2 2013-09-16 18:58:28
我原来是用去离子水洗。
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2楼2013-09-14 19:09:40
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han3028730

新虫 (初入文坛)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-09-15 21:11:15
去离子水和自带的TE buffer都可以，我之前用去离子水，因为洗脱效率高一些。但是现在我都是将TE buffer稀释十倍之后洗脱，可以水浴加热到60℃再用，以增加洗脱效率，这个方法很好用，你可以试试。
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3楼2013-09-14 19:17:26
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小周

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
这个无所谓，都可以的！
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5楼2013-09-14 21:46:57
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