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redx2011

银虫 (初入文坛)

[求助] 如何溶解包涵体

各位虫友,我过夜诱导的菌体收集后,用超声缓冲液超声之后,进行离心,沉淀应该用什么试剂去溶解。还有就是收集得到的菌体应该加多少缓冲液去超声波破碎?谢谢!
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hl16010921

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你先跑个电泳看看上清有没有。包涵体一般用8M的尿素溶然后透析复性,一般正确折叠的很少,活性很低。如果上清有,不追求产量的话活性高很多。
4楼2013-08-22 15:17:31
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查看全部 4 个回答

凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我自己回答的相关贴一时找不到了,楼主先看这个吧。

http://ishare.iask.sina.com.cn/f/18503995.html
2楼2013-08-22 01:24:37
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wangleisdnu

金虫 (正式写手)

通常我们一升菌液收集的菌体用10毫升的裂解液重悬。
没有遇到过包涵体,不能提供建议。

[ 发自小木虫客户端 ]
有勇气去改变你可以改变的,有度量去容忍你不能改变的,有智慧去区分上面的两种情况http://bbs.bioon.net/bbs/?66210
3楼2013-08-22 03:38:43
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