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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 不同变性梯度的DGGE图片，求解释
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mingcui1003

新虫 (初入文坛)

[求助] 不同变性梯度的DGGE图片，求解释

第一张DGGE图片胶的变性梯度为30%-55%，结果条带都集中在中间部分，所以调整了胶的梯度，将梯度改为35%-50%，结果见第二张图片，条带基本都在胶的最下面，不知道是什么原因？样品是完全一样的，理论上来说条带应该一样，只是在胶上分布的更开一些，已经两次出现这种原因了，不知道是怎么回事，和灌胶时的速度有关吗？
不同变性梯度的DGGE图片，求解释
第一张DGGE，变性梯度30%-55%


不同变性梯度的DGGE图片，求解释-1
第二张DGGE，变性梯度：35%-50%
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1楼 2013-08-18 17:12:50
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llvi

金虫 (小有名气)
★
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-20 12:02:59
个人认为，不是胶浓度调整的问题，是你配胶或者是灌胶过程中出现了浓度偏差。一般重做一遍就好了。灌胶过程，特别是注射器位置，是否安装牢固，灌胶器是否正常等等。
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2楼2013-08-18 20:58:26
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
mingcui1003: 金币+10, ★有帮助, 谢谢！ 2013-08-25 09:23:00
灌胶时会有误差，不要把梯度改变的那么窄，两边都减少一点先看看，条带分不开，可以尝试改变一下电压和时间~
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3楼2013-08-19 08:29:30
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彼岸花开V

至尊木虫 (正式写手)
个人感觉，DGGE重现性就是很差
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4楼2013-08-19 11:01:19
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我也觉得是灌胶的问题，DGGE重现性也不好。再仔细做一遍吧，个中原因还真不好解释清楚
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5楼2013-08-19 18:30:50
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mingcui1003

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by lhf903 at 2013-08-19 08:29:30
灌胶时会有误差，不要把梯度改变的那么窄，两边都减少一点先看看，条带分不开，可以尝试改变一下电压和时间~

请问一下电压和时间应该怎么变比较好？
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6楼2013-08-20 14:54:49
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by mingcui1003 at 2013-08-20 14:54:49
请问一下电压和时间应该怎么变比较好？...

一般就是把电压降低一点，时间跑长一点~
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7楼2013-08-20 14:56:01
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爱睡猪

金虫 (正式写手)
第一张图跑的不错啊~第二张图就无法解释了 重做看看
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ControlMyself
8楼2013-08-20 15:37:08
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hgl880205

铁虫 (初入文坛)
你的染色效果较好，咨询一下你的染色方法，谢谢！
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9楼2013-09-02 23:04:36
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阿忆在

新虫 (初入文坛)
你好，同样想请教下你的染色方法，我每次都没办法染得这么清楚，另外能咨询下你的胶最后是用什么方法得到照片的吗，我们这边用扫描，但是最后出来的图片都会变得很黑，原本胶上用肉眼还可以看到条带，出来的图片上就一片漆黑，不知道是什么原因
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10楼2013-09-10 18:11:30
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