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mingcui1003

新虫 (初入文坛)

[求助] 不同变性梯度的DGGE图片,求解释

第一张DGGE图片胶的变性梯度为30%-55%,结果条带都集中在中间部分,所以调整了胶的梯度,将梯度改为35%-50%,结果见第二张图片,条带基本都在胶的最下面,不知道是什么原因?样品是完全一样的,理论上来说条带应该一样,只是在胶上分布的更开一些,已经两次出现这种原因了,不知道是怎么回事,和灌胶时的速度有关吗?
不同变性梯度的DGGE图片,求解释
第一张DGGE,变性梯度30%-55%


不同变性梯度的DGGE图片,求解释-1
第二张DGGE,变性梯度:35%-50%
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llvi

金虫 (小有名气)


kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2013-08-20 12:02:59
个人认为,不是胶浓度调整的问题,是你配胶或者是灌胶过程中出现了浓度偏差。一般重做一遍就好了。灌胶过程,特别是注射器位置,是否安装牢固,灌胶器是否正常等等。
2楼2013-08-18 20:58:26
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
mingcui1003: 金币+10, 有帮助, 谢谢! 2013-08-25 09:23:00
灌胶时会有误差,不要把梯度改变的那么窄,两边都减少一点先看看,条带分不开,可以尝试改变一下电压和时间~
3楼2013-08-19 08:29:30
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彼岸花开V

至尊木虫 (正式写手)

个人感觉,DGGE重现性就是很差
4楼2013-08-19 11:01:19
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
我也觉得是灌胶的问题,DGGE重现性也不好。再仔细做一遍吧,个中原因还真不好解释清楚
5楼2013-08-19 18:30:50
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mingcui1003

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by lhf903 at 2013-08-19 08:29:30
灌胶时会有误差,不要把梯度改变的那么窄,两边都减少一点先看看,条带分不开,可以尝试改变一下电压和时间~

请问一下电压和时间应该怎么变比较好?
6楼2013-08-20 14:54:49
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lhf903

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
6楼: Originally posted by mingcui1003 at 2013-08-20 14:54:49
请问一下电压和时间应该怎么变比较好?...

一般就是把电压降低一点,时间跑长一点~
7楼2013-08-20 14:56:01
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爱睡猪

金虫 (正式写手)

第一张图跑的不错啊~第二张图就无法解释了 重做看看
ControlMyself
8楼2013-08-20 15:37:08
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hgl880205

铁虫 (初入文坛)

你的染色效果较好,咨询一下你的染色方法,谢谢!
9楼2013-09-02 23:04:36
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阿忆在

新虫 (初入文坛)

你好,同样想请教下你的染色方法,我每次都没办法染得这么清楚,另外能咨询下你的胶最后是用什么方法得到照片的吗,我们这边用扫描,但是最后出来的图片都会变得很黑,原本胶上用肉眼还可以看到条带,出来的图片上就一片漆黑,不知道是什么原因
10楼2013-09-10 18:11:30
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