| 查看: 1801 | 回复: 4 | ||
[求助]
绿藻植物基因组DNA提取
|
| 最近准备提某种藻类植物的基因组DNA，新手上路，请大家推荐下手提用哪些方法好用点？ 还有一个问题，就是如何能够去除色素？ |
回复此楼» 猜你喜欢
估计是周四
已经有3人回复
-
基金啊基金
已经有3人回复
-
科研孤儿太难了
已经有15人回复
-
让我中一个面上吧！
已经有10人回复
-
言之凿凿，明天官网会通知放榜？
已经有17人回复
-
时间戳又变了
已经有17人回复
-
今天系统多次维护，明天很可能放榜！
已经有11人回复
-
时间戳变了，能看出什么问题？
已经有23人回复
-
只有每年这种时候来逛逛小木虫
已经有22人回复
-
放榜前的不淡定
已经有12人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助：基因组DNA电泳无明显条带，成弥散状
已经有12人回复
- 酵母基因组DNA中的RNA怎么去除不掉？
已经有10人回复
- 哪里可以查植物基因组DNA大小及相关信息
已经有22人回复
- 大家来说说做southern blot时，基因组DNA的提取方法
已经有39人回复
- 【求助】对虾（肌肉）基因组DNA的提取，电泳上DNA主带和RNA条带之间是什么？
已经有8人回复
- 请问，用基因组DNA和cDNA做模板进行PCR有什么区别呀？
已经有6人回复
- 请大家帮我分析一下这张植物块根中提取的基因组DNA电泳图片
已经有7人回复
- 【求助】植物基因组DNA提取后的电泳检测
已经有9人回复
- 细菌基因组DNA提取 交流
已经有18人回复
- 基因组DNA提取问题
已经有32人回复
- 小鼠肝脏基因组DNA提取大部分降解为300-500bp了
已经有11人回复
- 植物基因组DNA提取的一些疑问~
已经有10人回复
- HindIII酶切基因组DNA
已经有4人回复
- 放线菌基因组DNA提取后，用TE不溶！！？
已经有20人回复
- 提基因组DNA电泳有三条带是怎么回事啊?
已经有6人回复
- 【求助/交流】提基因组DNA，加了异丙醇没有DNA析出~~~
已经有13人回复
- 【求助/交流】提取基因组DNA后琼脂糖凝胶电泳显示拖尾
已经有12人回复
- 【求助/交流】细菌基因组DNA的提取法（CTAB/NaCl 法）,提取的DNA是否为细菌总DNA? 非�
已经有11人回复
- 【求助/交流】提取的植物基因组DNA电泳图，疑问？？？
已经有17人回复
- 【求助/交流】物过量表达载体可否以基因组DNA进行
已经有6人回复
ecogene_wp
银虫 (初入文坛)
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 387.6
- 帖子: 19
- 在线: 22.1小时
- 虫号: 1802986
- 注册: 2012-05-08
- 性别: GG
- 专业: 全球变化生态学
2楼2013-08-01 21:44:07
3楼2013-08-01 21:54:29
Sthunder
木虫 (正式写手)
- 应助: 130 (高中生)
- 金币: 2337.8
- 散金: 15
- 红花: 9
- 帖子: 308
- 在线: 176.6小时
- 虫号: 2551016
- 注册: 2013-07-17
- 性别: GG
- 专业: 生物化学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
lance-tan: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-08-02 10:44:39
laozuzunzhe: 金币+4, good！ 2013-08-02 11:16:49
感谢参与，应助指数 +1
lance-tan: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-08-02 10:44:39
laozuzunzhe: 金币+4, good！ 2013-08-02 11:16:49
|
1 取盐藻20 ml，4 000 rps离心3 min，用枪移上清，最后留约1 ml，吹匀后移到1.5 mlEP管内，4 000 rps离心5 min。 2 向沉淀中加入567 μL的TE缓冲掖，用枪吹打使其充分悬浮，加3 μL的蛋白酶K（20mg/ml，该酶在95℃，10 min才失活），30 μL 10％的SDS，37 ℃温育1 h(每15 min混匀一次) 3 加100 μL的5 M的NaCl，用枪混匀，再加80 μL CTAB/NaCl（该试剂在使用前65℃温育使融化，再在室温冷却到30℃使用），混匀，65℃温育10 min。 4 加等体积（约750μL）氯仿/异戊纯（24/1），混匀（轻摇约5 min），12 000rps离心7 min，转上清到新管中。 5 加等体积的酚/氯仿/异戊醇（25/24/1），12 000 rpm离心7 min，转上清到新管中。 6 加入0.6体积的异丙醇，轻轻混合直到DNA沉淀下来，静置5 min，12 000 rpm离心5 min，弃上清，用70％乙醇洗涤沉淀两次（12 000 rpm离心1 min）。 7弃上清，放置使乙醇干燥。重溶于30～50μL TE（加RNA酶）中，65℃温育15 min，然后放置-20℃冰箱保存。 注： 1 一般基因组DNA能比质粒放得更久，且-20℃易降解而-80℃不易降解 2 步骤2中细胞悬浮后加入SDS和PK后可以直接颠倒EP管以混匀 3 步骤2后各步骤需要温和操作，防止基因组断裂。 4 CTAB提取液： NaCl 1.4MCTAB（w/v） 2％Tris•Cl 100mMEDTA 20mM巯基乙醇 0.2％ |
4楼2013-08-02 02:24:07
5楼2013-08-02 10:45:18
