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mepeng87

铜虫 (小有名气)

[求助] 发酵产酶必看,急急急急!!!!已有1人参与

我现在在做发酵产酶,好不容易筛到菌了,酶单位以每毫升酶液每分钟产生的每微克底物计算,酶量只有0.5U,做了一段时间优化了 效果也不好  这么低的酶活还有必要继续做下去吗?望各路大侠给与指点。
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wentanbaodao

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
优化培养基?不敢恭维,如果你说是国外的十分之一,也就是国外才5U,那这样的话,你的菌可能也就停留于此了。
菌种其实是最基本和本质的,你不用想着从培养基做起,只能从菌种做起,无论你用什么方法,必须把菌种提上去,再去做优化。
8楼2013-07-24 08:29:44
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
11楼: Originally posted by mepeng87 at 2013-07-24 09:25:31
培养基组分只简单的做了一下碳源氮源,其他的不知从何下手了?...

看了楼上的帖子,我觉得你应该一边做诱变(物理、化学的都该考虑一下),一边做优化,可以从碳源、氮源、碳氮比、生长因子、无机盐、此酶的前体或底物类似物等方面做,再去考虑优化发酵条件
12楼2013-07-24 12:21:55
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普通回帖

happylst

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2013-07-22 22:38:58
筛选得道德天然菌种都这样,几乎没有筛选出来酶活力就很高的  优化之后能提高一点就不错了 ,做基因改造吧  工程菌好点
紫龙
2楼2013-07-22 18:01:32
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mepeng87

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by happylst at 2013-07-22 18:01:32
筛选得道德天然菌种都这样,几乎没有筛选出来酶活力就很高的  优化之后能提高一点就不错了 ,做基因改造吧  工程菌好点

关键是今年是专硕毕业生,实验室没条件做基因改造而且也没有那么多时间了,担心这么低的酶活做下去,论文到时能通过吗?您是否有这方面的经验。
3楼2013-07-23 09:07:21
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wmwnyxt

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖 2013-07-23 17:10:57
LZ可以试试做紫外诱变或化学诱变,时间相对短些,用你现在的酶活比较下现有同类的文献。
Ifyouwanttocatchupwiththepaceoflife,youshouldfullfillyourselfatfirst
4楼2013-07-23 09:29:25
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mepeng87

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by wmwnyxt at 2013-07-23 09:29:25
LZ可以试试做紫外诱变或化学诱变,时间相对短些,用你现在的酶活比较下现有同类的文献。

老板说这个运气成分比较大,不建议做,酶活是国外的十分之一,国内的由于来源不同,相应的还没有可比的对象。
5楼2013-07-23 10:27:30
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zhangyt7638

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖应助 2013-07-23 17:11:37
不知你是做哪种酶的,优化一下培养基的组分及含量看看
6楼2013-07-23 13:26:56
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US

金虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
zhang8826857: 金币+1, 鼓励回帖应助 2013-07-23 17:11:08
产酶菌株如果是新菌株,别人以往没发现该菌株产生这种酶,具有特殊性,就可以做下去。否则,意义不大。
7楼2013-07-23 16:22:54
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mepeng87

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by US at 2013-07-23 16:22:54
产酶菌株如果是新菌株,别人以往没发现该菌株产生这种酶,具有特殊性,就可以做下去。否则,意义不大。

16sRNA鉴定是个新菌株,别人还没做过,这也是唯一的特殊性。也是我唯一坚持下去的动力。酶活很低,就是担心后期的酶的分离纯化不好做。
9楼2013-07-24 09:10:09
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mepeng87

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by wentanbaodao at 2013-07-24 08:29:44
优化培养基?不敢恭维,如果你说是国外的十分之一,也就是国外才5U,那这样的话,你的菌可能也就停留于此了。
菌种其实是最基本和本质的,你不用想着从培养基做起,只能从菌种做起,无论你用什么方法,必须把菌种提 ...

您说的很有道理,只是受于毕业时间限制,没有大把的时间去筛菌了,此课题寄托于国家自然科学基金,作为一个新的菌种,且国内还没有人做过,您看有做下去的必要吗?
10楼2013-07-24 09:19:17
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