| 查看: 5293 | 回复: 10 | |||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | |||
浅小尘木虫 (正式写手)
麦兜
|
[求助]
考马斯亮蓝法测定蛋白质含量问题，附有具体方法，做时出问题，不知原因请大家多指教。
|
||
|
（1）标准蛋白质溶液，用 牛血清白蛋白(BSA) ，配制成1.0mg/ml标准蛋白质溶液 （2）考马斯亮兰G —250染料试剂：称100mg 考马斯亮兰G—250 ，溶于50ml 95%的乙醇后，再加入120ml 85% 的磷酸，用水稀释至1 升。 （3）取10 支试管，1 支作空白，3支留作未知样品，其余试管分为两组按表中顺序，分别加入样品、水和试剂，即用1.0mg/ml的标准蛋白质溶液给各试管分别加入：0 、0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.1ml，然后用无离子水补充到0.1ml 。最后各试管中分别加入5.0ml 考马斯亮兰G —250试剂，每加完一管，立即在旋涡混合器上混合。 （4）加完试剂2~5 分钟后，即可开始用比色皿，在分光光度计上测定各样品在595nm处的光吸收值A595 ，空白对照为第1 号试管，即0.1mlH2O 加5.0mlG—250 试剂。 （5）用标准蛋白质量（u g ）为横座标，用吸光度值A595 为纵座标，作图，即得到一条标准曲线。 求高手指点我的过程有没有错误。非常感谢 测试完成以后 发现问题如下：1、第一个加了0.01ml标准蛋白质溶液在595nm处的吸光度为负值，不知道原因，求高手解答。整体符合递增。 2、我测得未知蛋白是转铁蛋白的浓度，标准曲线也要用牛血清白蛋白来做吗？可以用转铁蛋白来做吗？求高手解答 3、配置的标准蛋白以及G-250应当如何保存？可以重复使用吗？求高手解答？ 附件是我测试所用的具体方法与步骤。 |
回复此楼» 本帖附件资源列表
-
欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com - 附件 1 : Bradford法测定蛋白质浓度.pdf
2013-07-15 22:54:21, 206.4 K
» 收录本帖的淘帖专辑推荐
 生工检测理论与实务 |
» 猜你喜欢
有多少人是今天查系统知道结果的？
已经有17人回复
-
国自然面上复盘~欢迎讨论
已经有6人回复
-
售SCI一区文章，我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急
已经有4人回复
-
售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急
已经有4人回复
-
基金不中，共勉
已经有5人回复
-
看板上这么多中的，有点像50人群里49个人都是骗子的那种感觉……
已经有3人回复
-
我不理解！
已经有23人回复
-
2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战
已经有10人回复
-
系统查不到
已经有10人回复
-
怎么查啊
已经有5人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 求助，考马斯亮蓝方程，谢谢！
已经有4人回复
- 采用考马斯亮蓝法测蛋白酶活
已经有12人回复
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量时三个平行测得的值相差很大求解
已经有5人回复
- 考马斯亮蓝测定蛋白质
已经有18人回复
- 考马斯亮蓝测蛋白质
已经有14人回复
- 考马斯亮蓝法测定蛋白质含量的国标
已经有8人回复
- 吸附剂吸附蛋白，用考马斯亮蓝法测定，总是吸附后的数值比吸附前还大，怎么回事啊？
已经有9人回复
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量 中磷酸问题
已经有10人回复
- 考马斯亮蓝法测定蛋白过程中的问题
已经有23人回复
- 求助：关于考马斯亮蓝法测定蛋白质
已经有23人回复
- 考马斯亮蓝测定蛋白的结果受蛋白的分子量大小的影响吗？
已经有9人回复
- 考马斯亮蓝G250原理
已经有5人回复
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量 染色不均匀 好像没有溶解似地 怎么回事啊？
已经有13人回复
- 考马斯亮蓝法测蛋白质含量
已经有12人回复
- 【求助/交流】请问做蛋白质消化用考马斯亮蓝法还是福林-酚法检测好？
已经有5人回复
- 【求助/交流】关于考马斯亮蓝法测蛋白质含量
已经有4人回复
- 【求助/交流】考马斯亮蓝法测定蛋白质的标准曲线
已经有9人回复
- 【紧急求助】考马斯亮蓝配制问题
已经有5人回复
- 【求助/交流】请教考马斯亮蓝溶液的配置
已经有14人回复
- 【求助/交流】[求助]考马斯亮蓝法测定蛋白质的问题
已经有3人回复
浅小尘
木虫 (正式写手)
麦兜
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1654.5
- 散金: 89
- 红花: 8
- 帖子: 671
- 在线: 396.6小时
- 虫号: 1421252
- 注册: 2011-09-28
- 性别: GG
- 专业: 生物材料
7楼2014-02-28 16:45:54
群殴不做咸鱼
铁虫 (小有名气)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 1326.7
- 散金: 167
- 红花: 1
- 帖子: 241
- 在线: 151小时
- 虫号: 2345352
- 注册: 2013-03-14
- 性别: MM
- 专业: 环境工程
2楼2013-07-20 20:14:56
霹雳光
至尊木虫 (著名写手)
- 应助: 20 (小学生)
- 金币: 15182.3
- 散金: 142
- 红花: 67
- 帖子: 1985
- 在线: 643.1小时
- 虫号: 777482
- 注册: 2009-05-23
- 专业: 昆虫学
3楼2013-08-29 20:33:42
浅小尘
木虫 (正式写手)
麦兜
- 应助: 2 (幼儿园)
- 金币: 1654.5
- 散金: 89
- 红花: 8
- 帖子: 671
- 在线: 396.6小时
- 虫号: 1421252
- 注册: 2011-09-28
- 性别: GG
- 专业: 生物材料
4楼2013-08-30 09:13:31
