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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 考马斯亮蓝测定蛋白质
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wmy2008diao1

铜虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝测定蛋白质

考马斯亮蓝试剂配置完后需要过滤么？为什么配出来的溶液总有絮状物，测定时分光光度计不停地跳，数值总是不准？？？
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1楼 2012-11-12 15:11:26
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殷灿灿

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般需要过滤，但不过滤也可能行，不停跳可能是比色皿不干净或者是仪器的问题
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2楼2012-11-12 16:34:01
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
配出来有絮状沉淀，这个就看你的用的试剂有没有问题。有絮状沉淀你在测定是肯定会影响吸光度，造成吸光值不稳定。
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3楼2012-11-12 16:56:42
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wmy2008diao1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sunnymen at 2012-11-12 16:56:42
配出来有絮状沉淀，这个就看你的用的试剂有没有问题。有絮状沉淀你在测定是肯定会影响吸光度，造成吸光值不稳定。

为什么我配出来的溶液是蓝色的 而有些人配出来是棕红色的？？这个让我也很是困扰~
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4楼2012-11-12 17:02:00
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2320

金虫 (正式写手)

善变小鬼

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我师姐做的时候也没过滤，她配的也是蓝色溶液，测定的时候数值跳动可能是比色皿没洗干净吧。
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简单的快乐着；简单的幸福着；简单的努力着。加油！
5楼2012-11-12 17:36:22
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by wmy2008diao1 at 2012-11-12 17:02:00
为什么我配出来的溶液是蓝色的 而有些人配出来是棕红色的？？这个让我也很是困扰~...

这个看你用的是考马斯亮蓝G250还是R250
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6楼2012-11-12 17:57:00
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小毛孩24

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
考马斯亮蓝溶液配的好的话是一点沉淀都没有的，注意试剂配制过程中配加顺序和速度。
吸光值如果不停的跳，但始终在某个小范围里跳的话也可以接受。
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7楼2012-11-12 18:46:53
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changing9

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
絮状沉淀没遇到过。用之前要过滤。
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永不回头！
8楼2012-11-12 20:03:05
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娇娇19871019

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用的是G250，配溶液时按照乙醇、磷酸、水定容的顺序加，配完后是蓝绿色，但过滤后就是红棕色，我刚试过的，效果不错
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9楼2012-11-13 08:36:59
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娇娇19871019

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

用的是G250，配溶液时按照乙醇、磷酸、水定容的顺序加，配完后是蓝绿色，但过滤后就是红棕色，我刚试过的，效果不错
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10楼2012-11-13 08:37:12
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