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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 考马斯亮蓝测定蛋白质
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zhourong372

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
过滤会好一点。吸光值不停跳也可能是仪器预热问题。
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懒人、辣妈
11楼2012-11-13 09:44:42
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wmy2008diao1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 娇娇19871019 at 2012-11-13 08:37:12
用的是G250，配溶液时按照乙醇、磷酸、水定容的顺序加，配完后是蓝绿色，但过滤后就是红棕色，我刚试过的，效果不错

我的操作步骤是100mg的考马斯+50ml95%的乙醇+100ml85%的磷酸定容到1000ml.一般要溶解多久才能完全溶解呢？？是在乙醇里溶解的是不？？？
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12楼2012-11-13 16:09:11
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lezai945

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我之前做的也是G250，直接配置后静置，标准曲线做的非常好，R方几乎是1.000。多操作几遍吧，换个分光光度计试试。
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13楼2012-11-14 11:19:13
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娇娇19871019

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

溶解挺快的吧这个我没太注意，不过里面难免会有一些絮状物
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14楼2012-11-14 12:01:37
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hsd3521

主管区长 (知名作家)

火星驻地球联络处主任科员

优秀区长优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一定要过滤
絮状沉淀为体系偏酸性 考马斯亮蓝G250凝集所致
吸光度不稳的原因有多种 最主要的还是絮状沉淀造成的 可考虑体系稳定后 进行比色
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太胖了！~
15楼2012-11-14 18:51:25
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木叶super

金虫 (正式写手)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 娇娇19871019 at 2012-11-13 08:37:12
用的是G250，配溶液时按照乙醇、磷酸、水定容的顺序加，配完后是蓝绿色，但过滤后就是红棕色，我刚试过的，效果不错

为什么我过滤之后在使用的时候还有絮状的沉淀呢？配制的过程中可不可以超声呢
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人生，只要还有一线希望，就还有无限可能
16楼2014-12-23 22:06:28
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匿名

本帖仅楼主可见
17楼2017-01-04 16:44:49
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一念执着00

木虫 (正式写手)
有絮状说明有沉淀，需要过滤就好了

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18楼2017-01-05 23:35:03
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一念执着00

木虫 (正式写手)
蓝色是对的

发自小木虫Android客户端
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19楼2017-01-05 23:35:16
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