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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 食品 » 粮油与蛋白 » 考马斯亮蓝测定蛋白质
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wmy2008diao1

铜虫 (小有名气)

[求助] 考马斯亮蓝测定蛋白质

考马斯亮蓝试剂配置完后需要过滤么？为什么配出来的溶液总有絮状物，测定时分光光度计不停地跳，数值总是不准？？？
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1楼2012-11-12 15:11:26
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wmy2008diao1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
10楼: Originally posted by 娇娇19871019 at 2012-11-13 08:37:12
用的是G250，配溶液时按照乙醇、磷酸、水定容的顺序加，配完后是蓝绿色，但过滤后就是红棕色，我刚试过的，效果不错

我的操作步骤是100mg的考马斯+50ml95%的乙醇+100ml85%的磷酸定容到1000ml.一般要溶解多久才能完全溶解呢？？是在乙醇里溶解的是不？？？
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12楼2012-11-13 16:09:11
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殷灿灿

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
一般需要过滤，但不过滤也可能行，不停跳可能是比色皿不干净或者是仪器的问题
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2楼2012-11-12 16:34:01
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sunnymen

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
配出来有絮状沉淀，这个就看你的用的试剂有没有问题。有絮状沉淀你在测定是肯定会影响吸光度，造成吸光值不稳定。
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3楼2012-11-12 16:56:42
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wmy2008diao1

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by sunnymen at 2012-11-12 16:56:42
配出来有絮状沉淀，这个就看你的用的试剂有没有问题。有絮状沉淀你在测定是肯定会影响吸光度，造成吸光值不稳定。

为什么我配出来的溶液是蓝色的 而有些人配出来是棕红色的？？这个让我也很是困扰~
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4楼2012-11-12 17:02:00
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