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凉皮

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 克隆基因为什么一直连不到载体上

目的载体双酶切确定可以切开，含有同样酶切位点的目的片段先连到PMD19-T上的，之后把目的片段从PMD-19-T载体上切下来之后，却又连不到目的载体上了，究竟是什么原因呢?

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1楼2013-07-04 21:45:33

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lillian菲

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★
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gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-07-05 15:04:38

你用的是T4连接酶吗？还有连接的时间温度都是需要注意的。还有载体和目的片段的浓度也是比较重要的，你看TA克隆试剂盒上都有详细说明的，你可以在做酶连之前测下各自的浓度是否符合说明书上的，然后再改进

赞一下(1人)

6楼2013-07-05 10:58:25

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