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xinting0627

铁虫 (初入文坛)

[交流] 定量PCR模板浓度问题 已有1人参与

我做的定量PCR,实验组和对照组的内参GAPDH的cq值在18-20左右。但是目的基因就是30多。请问
1、这样的话表达结果可靠吗?
2、如果我将内参的模板浓度稀释,将目的基因的模板浓度加倍,使得两个基因的cq值相差不大。这样的结果可靠吗?
恳请高手解答,谢谢。
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
myprayer: 金币+1, Gifts of roses, there are lingering fragrance. Look forward to your wonderful and more detailed answer. 2013-07-05 08:21:36
结果是否可靠要看你做标准曲线时候的线性范围。CT值一般在15-30的时候比较好,做标准曲线的时候一般也是在这个范围。如果内参和目的基因的CT相差实在太大,可以按照你说的稀释内参模板,增加目的基因的模板来P。
2楼2013-07-05 00:47:12
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