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新虫 (初入文坛)

[求助] 胶回收纯度不好

酶切之后胶回收结果不理想,DNA的纯度不好,260/230比值过低,还不到1。下面要送去做显微注射,现在很着急。胶回收试剂盒用的是Qiagen的,最后洗脱时用的是1*TE,并且把电泳的琼脂糖,电泳液均换成新的,结果还是不好,谁能提供好的建议么?急!急!急!多给金币
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世外清风

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-07-04 15:41:13
单酶切直接用酚氯仿纯化即可
3楼2013-07-03 19:59:52
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至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+5, BioEPI+1 2013-07-04 15:40:39
第一、加大上样量
第二、过柱子的时候多过几次
第三、PCR的时候,加两个循环,如果产物是PCR获得的话
第四、琼脂糖胶用低浓度的
试验顺利~~
总有一天我要修改用户名。
2楼2013-07-02 18:56:25
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muyouleya

铜虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
洗脱时的TE加热一下,约50~70度,试试看胶回收的效果。如果浓度还是不行,建议你大量回收然后浓缩。
4楼2013-07-04 19:44:40
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