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bishopsleeve

新虫 (初入文坛)

[求助] 关于用对硝基苯酚法测脂肪酶活的问题 已有2人参与

根据文献方法
溶液A:30毫克的乙酸对硝基苯酯溶于90毫升的异丙醇中
溶液B:2.0gTriton X-100,0.5g阿拉伯树胶溶于450ml的磷酸缓冲溶液。
溶液A与溶液B以1:9混合(现配)得到反应基质。反应时取9ml反应基质预热5min,然后加入1ml酶液(空白以去离子水替代),反应十五分钟后在400nm处测吸光值。

我的问题是这个反应怎么终止呢?我试过各个文献中提到的放置于冰上;加10、15、20ml的95%乙醇;加5ml的三氯乙酸,然后用氢氧化钠调pH至加入三氯乙酸前。这些方法都不能完全终止反应,求指点~

有的文献中不终止反应,就在比色皿中进行反应,然后测酶活,再根据摩尔消光系数算。这样不准确吧?时间不好控制啊
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2011jonathan

禁虫 (小有名气)

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3楼2013-12-05 20:23:55
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