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NEVER000

木虫 (小有名气)

[求助] 自诱导不表达

用IPTG诱导表达,全是包涵体。改用自诱导表达时,37度下也是包涵体,然而30°和25°却不表达,这是怎么回事啊?
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
NEVER000: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-01 15:17:52
楼主是否测了诱导前和诱导后菌液的OD
2楼2013-07-01 13:43:16
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虫吃棒子

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
NEVER000: 金币+1, ★★★很有帮助 2013-07-01 15:18:34
IPTG浓度调节看看,再不行换表达方案
3楼2013-07-01 13:50:33
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NEVER000

木虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by whb21 at 2013-07-01 13:43:16
楼主是否测了诱导前和诱导后菌液的OD

IPTG诱导前0.6,自诱导未测浓度
4楼2013-07-01 15:17:37
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NEVER000

木虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 虫吃棒子 at 2013-07-01 13:50:33
IPTG浓度调节看看,再不行换表达方案

什么表达方案?能具体点吗?谢谢
5楼2013-07-01 15:18:27
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
4楼: Originally posted by NEVER000 at 2013-07-01 15:17:37
IPTG诱导前0.6,自诱导未测浓度...

建议楼主测一下诱导前后的菌液浓度,确定一下诱导后菌是否有生长。
6楼2013-07-01 16:28:10
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NEVER000

木虫 (小有名气)

引用回帖:
6楼: Originally posted by whb21 at 2013-07-01 16:28:10
建议楼主测一下诱导前后的菌液浓度,确定一下诱导后菌是否有生长。...

已经非常浓了,很明显
7楼2013-07-02 09:08:09
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whb21

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

建议楼主查一查所用的表达系统,质粒、宿主、实在不行就换换吧
8楼2013-07-02 09:30:41
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