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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 融合蛋白镍柱纯化求教？
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灵岩苏

禁言 (小有名气)
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1楼 2013-06-27 16:32:43
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cicelyzh

铁杆木虫 (职业作家)
★ ★
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137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-06-29 17:23:14
首先确定是杂带，不是目标蛋白的其他形式。此外，有些天然蛋白与镍离子有较强的亲和性。你可以打下制品看看是什么蛋白，再做分析。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2013-06-28 00:48:50
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ruth_3912834

铜虫 (小有名气)
★ ★
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137167741: 金币+1, 小木虫交流，共同进步~~ 2013-06-29 17:23:23
杂蛋白没洗干净呗，调试一下咪唑浓度多洗洗啦
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3楼2013-06-29 16:41:05
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阳光123456

禁言 (小有名气)
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4楼2013-07-16 14:34:46
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lkp282704124

木虫 (小有名气)
再做一次试试呗！
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假作真时真亦假，无为有处有还无。
5楼2013-07-16 16:22:43
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biology-girl

新虫 (正式写手)
★
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引用回帖:
4楼: Originally posted by 阳光123456 at 2013-07-16 14:34:46
你宿主细胞的分子伴侣蛋白会与融合蛋白结合吗？
我之前遇到的是这样的情况，上样前加入5mM DTT，或者使用10mM MgSO4 50mM Tris，2mM ATP 先反应20分钟，让伴侣蛋白去结合，结果就很漂亮了。
还有注意上样前加入5m ...

请问 您用的是哪种宿主表达呢？
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6楼2014-06-16 09:51:08
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