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805085868

铁虫 (小有名气)

[求助] 问大家一个有关反转录内参的问题

本人现在在做反转录,我现在有一个问题,用16S做内参时,PCR出来的条带特别亮,这样的话做内参定量不行啊,我现在想换一个内参,(虽然我知道做内参的要求,即看家基因,)但不知道我这个链霉菌基因组里哪个基因是看家基因,所以现在很纠结,希望大家给小弟提点建议,谢谢、
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俺只是个小硕
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新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
805085868: 金币+8, 有帮助, 4 2013-06-22 09:55:46
以下浅见,楼主参考
1. 看文献  看别人有没有做过除16S以外的基因为内参基因
2. 选几个housekeeping genes,自己实验验证。即在不同的实验处理条件下,基因的表达量几乎恒定;
推荐几篇文献http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0006291X03025646
http://genomebiology.com/2002/3/7/research/0034/
http://www.biomedcentral.com/1471-2105/11/253
http://genomebiology.com/2002/3/7/research/0034/
2楼2013-06-21 21:03:39
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