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805085868

铁虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 75.4
散金: 31
帖子: 92
在线: 26.5小时
虫号: 1393000
注册: 2011-09-06
性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能

[求助] 问大家一个有关反转录内参的问题

本人现在在做反转录，我现在有一个问题，用16S做内参时，PCR出来的条带特别亮，这样的话做内参定量不行啊，我现在想换一个内参，（虽然我知道做内参的要求，即看家基因，）但不知道我这个链霉菌基因组里哪个基因是看家基因，所以现在很纠结，希望大家给小弟提点建议，谢谢、

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俺只是个小硕

1楼 2013-06-20 15:18:00

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fdzkfdzk1

新虫 (初入文坛)

应助: 3 (幼儿园)
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专业: 生物大分子结构与功能

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
805085868: 金币+8, ★有帮助, 4 2013-06-22 09:55:46

以下浅见，楼主参考
1. 看文献看别人有没有做过除16S以外的基因为内参基因
2. 选几个housekeeping genes，自己实验验证。即在不同的实验处理条件下，基因的表达量几乎恒定；
推荐几篇文献http://www.sciencedirect.com/sci ... i/S0006291X03025646；
http://genomebiology.com/2002/3/7/research/0034/；
http://www.biomedcentral.com/1471-2105/11/253；
http://genomebiology.com/2002/3/7/research/0034/。

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2楼2013-06-21 21:03:39

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