应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » RNA逆转录DNA
111/2返回列表12下一页
查看: 2467  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

qinhuan0425

新虫 (初入文坛)

[交流] RNA逆转录DNA 已有9人参与

请教：用Takara的逆转录试剂盒，推荐程序为37度15分钟，85度15秒，PCR仪上设置为37度15分钟，85度15秒，end.逆转录完后晚了20分钟将产物拿出，会影响cDNA得率吗？
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

双双WC

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-06-02 15:29:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

porphybaby

金虫 (正式写手)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖应助！ 2013-06-03 18:18:02
不会的

因为你85℃ 15 s 目的就是让 反转录酶 失活 终止反转录反应 自从这个之后 你原先体系有多少cDNA 就是多少了 不会再增多 也不会说 再减少

因为已经转成了 cDNA 它已经不再是RNA 因此没那么脆弱 不容易降解 你接下来的操作 都可以在外面进行

另外我不知道你的意思是 85℃ 持续了20分钟 还是 说 85℃结束后 停止加热 恢复到室温 20分钟后你取出

如果你是 持续加热那么长时间的话 可能会有一定影响吧
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2013-06-03 00:06:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

710002191

银虫 (小有名气)
★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-02 16:14:03
应该不会的吧，DNA在常温可能会降解，但是就半个小时应该没什么问题吧，一般放-20的话可以长期保存的，我们前段时间用了一个在-20保存了一年的逆转录得到的DNA也是一点问题没有的
赞一下 回复此楼
may
2楼2013-06-02 15:55:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

bullfrog325

木虫 (正式写手)
★
gyesang: 金币+1, 鼓励回帖应助！ 2013-06-02 16:14:09
没问题的
回复此楼
3楼2013-06-02 16:06:51
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wchuangqi

铜虫 (小有名气)
我觉得没事了
回复此楼
天道酬勤
5楼2013-06-03 08:10:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zgb1982

木虫 (正式写手)
没事了
回复此楼
6楼2013-06-03 16:43:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

soarrow

铁杆木虫 (正式写手)

酱油歪楼党
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
P事没有
我们实验室常用的RT-PCR盒子，37-50度反转录完了得95度15分钟，激活DNA聚合酶
DNA比RNA稳定多了，放心吧
赞一下 回复此楼
7楼2013-06-04 00:59:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

qinhuan0425

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
7楼: Originally posted by soarrow at 2013-06-04 00:59:04
P事没有
我们实验室常用的RT-PCR盒子，37-50度反转录完了得95度15分钟，激活DNA聚合酶
DNA比RNA稳定多了，放心吧

放心了，3Q
回复此楼
8楼2013-06-04 09:05:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

chenhuize

木虫 (正式写手)
完全没问题
回复此楼
9楼2013-06-04 10:21:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

双双WC

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
完全没有问题，拿出来直接可以做，豪放点。我有师姐做实验都不进超净，直接实验台上弄
赞一下 回复此楼
10楼2013-06-04 11:39:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 qinhuan0425 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 帮忙看看fileCode +4 wwncly 2026-08-10 8/400 2026-08-10 22:07 by demonstreets
[基金申请] FileCode能看出啥？ +7 要乐观耀哥 2026-08-10 15/750 2026-08-10 19:29 by 要乐观耀哥
[基金申请] 确定了，国自然21号放榜 +6 布布和一二 2026-08-10 7/350 2026-08-10 19:15 by 2000zf36392
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 我的国基提前知道中了，可是同事的操作让我实在接受不了，怎么会有这样的人 +8 家与远方 2026-08-10 11/550 2026-08-10 17:09 by 六两废铜
[基金申请] 奇怪，两个人的filecode固定段从头到尾一模一样 +4 布布和一二 2026-08-10 4/200 2026-08-10 14:50 by 医学老男孩
[基金申请] 据悉今年马上要出结果了 +7 瞬息宇宙 2026-08-10 8/400 2026-08-10 12:42 by Vivilian
[基金申请] 2026国自然放榜时间 +9 布布和一二 2026-08-08 9/450 2026-08-10 11:22 by xxxx2020
[基金申请] filecode与中标关系的预测 +5 布布和一二 2026-08-07 5/250 2026-08-09 16:15 by 袁向阳007
[基金申请] fileCode有新解读？ +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode，很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 关于豆爷回答的JTJC与%2F数量 +5 yang182083 2026-08-06 7/350 2026-08-08 18:29 by zhanghaozhu
[基金申请] 固定端突然变了，今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] 听说今天filecode变了 +24 布布和一二 2026-08-06 47/2350 2026-08-07 16:02 by zhiyanjiang
[基金申请] filecode变化情况 +6 布布和一二 2026-08-07 22/1100 2026-08-07 14:45 by 且听虎啸
[基金申请] 大家散了吧，后缀研究没有意义，别浪费时间了，过好目前的每一天，不要焦虑 +5 Tide man 2026-08-06 7/350 2026-08-07 13:11 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 好消息？这个有何含义？？？ +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
[基金申请] 有没有H口的？有收到消息的吗？ +3 超级海虾 2026-08-04 3/150 2026-08-04 17:26 by 学教育滴
[基金申请] 纯娱乐，不喜欢勿喷 +7 Tide man 2026-08-04 10/500 2026-08-04 15:10 by loufangrui
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭