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DEAE——Sepharose离子交换纯化 流速变慢
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在做DEAE——Sepharose Fast Flow离子交换纯化酶的研究，是用的NaCl梯度洗脱，刚开始流速正常，但经过7-8小时后流速就变慢了，需要再次提高泵的转速，之后7-8小时后再次变慢，需要再次提高泵的转速； 我用的是2年前师姐用过的柱材料，分离效果还不错，但就是出现流速变慢的情况；蠕动泵是上海沪西的；上样前样液已经过0.44um膜过滤了；是NaCl浓度逐渐增加导致的问题吗？我上样的体积比较大，是不是样品量太大把柱子堵了?但是梯度洗脱前用缓冲液冲洗杂蛋白的时候没有堵啊？ 还是别的原因请各位高手给小弟分析分析。 [ Last edited by 小李爱学习 on 2013-5-29 at 10:42 ] |
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