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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » DEAE-Sepharose FF层析柱规格 及填料的预处理
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xlshi07

禁虫 (小有名气)
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1楼 2013-03-12 16:15:58
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

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xlshi07: 金币+3, ★★★很有帮助 2013-03-14 08:14:29
楼主我来给你解答，一看你买的这个就知道是GE的层析填料，是离子交换性质的吧，你说到是25ml，我想应该已经不是粉末状的了吧，这说明已经溶胀好了，不需要在处理了。用多大的柱子，有一个体积计算的方法，楼主不妨从网上查查，查不到的话，我在帮你查，现在我也不记得了。楼主说的除去原本溶剂是不是说的保存层析填料的溶液啊，据我说知，这个溶液应该是20%的乙醇，直接用水洗就可以了，知道流出液中不在有酒精的味道。填充到柱子中，最好要有个蠕动泵或者是FPLC，要么就靠重力流，但是重力流用的时间要长，而且还不一定能把柱子装的比较实。就这些吧，还有不明白的加我号码问吧，254758231，注明小木虫
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4楼2013-03-13 12:47:33
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gccsf

铜虫 (初入文坛)
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9楼2013-05-10 22:55:32
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
粘稠状的液体，应该是直接就可以用的吧。LZ可以把厂家型号报一下
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2楼2013-03-12 16:40:39
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xlshi07

禁虫 (小有名气)
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3楼2013-03-13 10:58:40
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
xlshi07: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-03-14 08:14:42
装到柱子里，可以自然沉降，也可以用蠕动泵设定一个流速去装。先用水洗2-5倍柱体积除去乙醇，再用你的bufferA，也就是低盐或者无盐的buffer洗，洗完了就可以上样了。
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5楼2013-03-13 12:55:17
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)
顺道问问，你买的25 ml多少钱？
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6楼2013-03-13 12:55:32
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xlshi07

禁虫 (小有名气)
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7楼2013-03-14 08:02:46
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gaojuan1985

新虫 (正式写手)
25ml啊，一般直径是1-3cm的都可以啊。我通常用的直径是2.5cm左右。凝胶能承受的最高流速要根据柱子的截面积来计算的。
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8楼2013-03-14 10:49:26
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xlshi07

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10楼2013-05-11 09:05:14
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