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eric73

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于 DEAE Sepharose FF 使用方法

大家好,
我是第一次使用DEAE Sepharose FF 来分离带有羧基的水溶性大分子。想了解有关DEAE-FF 的使用方法。
1. DEAE-FF 在使用前是保存在20%的乙醇里。在除掉乙醇后,DEAE-FF需要用NaOH溶液来活化吗? 如果需要,用多大的浓度好呢?
2. 在上样之前,DEAE-FF需要用1M的NaCl溶液或者NaOH溶液处理,使它再生吗?
3. 每次在分离完样品后,DEAE-FF都需要再生处理吗?

谢谢大家,
Merry X-mas and happy new year!
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domyself
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-12-21 10:32:24
我来给你回答,首先在使用前,去掉20%的乙醇,然后就是用水洗,洗到没有乙醇的味道就好了
上样之前,看你是在什么情况下了,如果在第一步做好后就上样,当然是不需要了,如果在第一步做好后,过夜了,最好是处理一下,用naoh好了,
每次做完后,必须要再生,如果不再生的话,下次就不能用了
2楼2012-12-20 11:52:49
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eric73

铁虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-12-19 22:52:49
我来给你回答,首先在使用前,去掉20%的乙醇,然后就是用水洗,洗到没有乙醇的味道就好了
上样之前,看你是在什么情况下了,如果在第一步做好后就上样,当然是不需要了,如果在第一步做好后,过夜了,最好是处理一 ...

您的意思就是在去掉乙醇后还是要用NaOH活化,然后才能上样。要是柱子过夜或者好久不用,那就要用NaOH处理(也就是再生)。如果再生的时候,用1M 的NaCl溶液可以吗?

谢谢
domyself
3楼2012-12-21 00:18:39
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
eric73: 金币+2, ★★★很有帮助, thanks 2012-12-21 11:07:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by eric73 at 2012-12-21 00:18:39
您的意思就是在去掉乙醇后还是要用NaOH活化,然后才能上样。要是柱子过夜或者好久不用,那就要用NaOH处理(也就是再生)。如果再生的时候,用1M 的NaCl溶液可以吗?

谢谢...

去掉乙醇直接用水冲洗到没有乙醇的味道就好了,这个要根据经验了,再生的话,1M的NACL这个我没有用过,所以不敢乱说啊
4楼2012-12-21 08:58:10
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