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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 天然药物化学 » 关于 DEAE Sepharose FF 使用方法
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eric73

铁虫 (初入文坛)

[求助] 关于 DEAE Sepharose FF 使用方法

大家好，
我是第一次使用DEAE Sepharose FF 来分离带有羧基的水溶性大分子。想了解有关DEAE－FF 的使用方法。
1. DEAE-FF 在使用前是保存在20%的乙醇里。在除掉乙醇后，DEAE-FF需要用NaOH溶液来活化吗？ 如果需要，用多大的浓度好呢？
2. 在上样之前，DEAE-FF需要用1M的NaCl溶液或者NaOH溶液处理，使它再生吗？
3. 每次在分离完样品后，DEAE-FF都需要再生处理吗？

谢谢大家，
Merry X-mas and happy new year!
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domyself
1楼 2012-12-20 05:53:32
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eric73

铁虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by lihuan0525 at 2012-12-19 22:52:49
我来给你回答，首先在使用前，去掉20%的乙醇，然后就是用水洗，洗到没有乙醇的味道就好了
上样之前，看你是在什么情况下了，如果在第一步做好后就上样，当然是不需要了，如果在第一步做好后，过夜了，最好是处理一 ...

您的意思就是在去掉乙醇后还是要用NaOH活化，然后才能上样。要是柱子过夜或者好久不用，那就要用NaOH处理（也就是再生）。如果再生的时候，用1M 的NaCl溶液可以吗？

谢谢
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domyself
3楼2012-12-21 00:18:39
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
jiangchunyong: 金币+1, 谢谢 2012-12-21 10:32:24
我来给你回答，首先在使用前，去掉20%的乙醇，然后就是用水洗，洗到没有乙醇的味道就好了
上样之前，看你是在什么情况下了，如果在第一步做好后就上样，当然是不需要了，如果在第一步做好后，过夜了，最好是处理一下，用naoh好了，
每次做完后，必须要再生，如果不再生的话，下次就不能用了
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2012-12-20 11:52:49
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

★ ★
eric73: 金币+2, ★★★很有帮助, thanks 2012-12-21 11:07:13
引用回帖:
3楼: Originally posted by eric73 at 2012-12-21 00:18:39
您的意思就是在去掉乙醇后还是要用NaOH活化，然后才能上样。要是柱子过夜或者好久不用，那就要用NaOH处理（也就是再生）。如果再生的时候，用1M 的NaCl溶液可以吗？

谢谢...

去掉乙醇直接用水冲洗到没有乙醇的味道就好了，这个要根据经验了，再生的话，1M的NACL这个我没有用过，所以不敢乱说啊
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4楼2012-12-21 08:58:10
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