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anruoka

木虫 (正式写手)

[求助] 求助:10吨发酵罐培养大肠杆菌OD下降问题 已有5人参与

10吨发酵罐 生产用菌种 大肠杆菌 最近一个月突然出现一个问题:菌种长到一定阶段,有时候是加补料之前,有时候是之后。半个小时到一个小时时间内OD600,很快降到1以下,在OD下降之前,通常DO上升,泡沫很多,很粘稠。做双层板没有噬菌斑,偶尔培养两天以后部分菌落中心有空白,菌落呈圆环庄,不是噬菌斑那种透明圈。奇怪的是,发酵液OD已经很低了,拿过来用LB摇瓶还能长起来。找不到是什么原因,无聊、压缩空气什么的都排查过,还是解决不了,几乎每一罐都要挂掉。
求助:10吨发酵罐培养大肠杆菌OD下降问题
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求助:10吨发酵罐培养大肠杆菌OD下降问题-1
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我是一只好虫子
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chshen06188

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
较大可能是噬菌体污染,双层平板做不出要考虑实际操作原因。
检查罐体各个系统的设备和管件是否有渗漏,包括但不限于:空气、补料、移种、液氨。
注意做好车间通风、清洁,严格控制活菌体排放。
竹杖芒鞋轻胜马,一蓑风雨任平生。
8楼2013-05-28 08:21:41
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查看全部 23 个回答

志子

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励交流! 2013-05-27 08:19:26
是否罐压过高,压力升高导致CO2溶解度上升得比氧的快。而发酵液中CO2浓度过高,会影响代谢,可能会毒害细胞。
但是看你平板,,,,如果是噬菌体污染,建议实验把菌种和培养基都换了小试一下看。
2楼2013-05-26 01:51:41
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anruoka

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 志子 at 2013-05-26 01:51:41
是否罐压过高,压力升高导致CO2溶解度上升得比氧的快。而发酵液中CO2浓度过高,会影响代谢,可能会毒害细胞。
但是看你平板,,,,如果是噬菌体污染,建议实验把菌种和培养基都换了小试一下看。

罐压很低,培养基和发酵工艺都是确定的,做了很多年了
我是一只好虫子
3楼2013-05-26 11:24:01
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小花木兰

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
laozuzunzhe: 金币+1, 鼓励交流! 2013-05-27 08:19:36
培养基组成有关的,影响很大,还有补料也有关系
4楼2013-05-26 20:42:40
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